高脂飲食下血漿TNF-α、IL-6和FFA變化特點的研究.pdf

1、研究背景：對于2型糖尿病(type2diabetesmellitus，T2DM)發(fā)病因素的研究不斷有新的進展，目前認為胰島素抵抗是T2DM發(fā)病的中心環(huán)節(jié)，但產(chǎn)生胰島素抵抗的原因以及在胰島素抵抗的基礎上如何發(fā)展為T2DM仍不十分清楚?！爸拘浴奔僬f認為長期的高脂血癥可以影響β細胞功能，并進一步損害葡萄糖內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，最終導致T2DM的發(fā)生，該假說強調(diào)了脂代謝紊亂在T2DM發(fā)病中的重要性。近來又有假說認為T2DM可能是一種“自然免疫和低強度

2、的炎癥性疾病”，這方面的證據(jù)源自早期的臨床流行病學調(diào)查研究，起初僅是觀察到新發(fā)的T2DM患者有明顯的白細胞計數(shù)增加，后來又發(fā)現(xiàn)在肥胖或T2DM患者血漿中γ球蛋白、腫瘤壞死因子—α(tumornecrosisfactor-α，TNF-α)、白細胞介素—6(interleukin-6，IL-6)等明顯增高。而一項以肥胖患者為對象的前瞻性研究證明C反應蛋白(C-reactiveprotein，CRP)和IL-6是T2DM發(fā)病的重要預報因子。除

3、了流行病學證據(jù)外，基礎和臨床實驗研究中也發(fā)現(xiàn)了新的證據(jù)：給予肥胖的嚙齒類動物大劑量水楊酸治療后可以逆轉高血糖，高胰島素血癥和血脂異常；而將離體培養(yǎng)的脂肪細胞暴露在大劑量的炎癥介質中，可以很快觀察到細胞內(nèi)胰島素信號轉導障礙。因此炎癥被認為是連接肥胖、胰島素抵抗與T2DM的重要環(huán)節(jié)。在對炎癥的進一步研究中，逐漸認識到脂肪組織具有重要的內(nèi)分泌功能，如TNF-α，IL-6等促炎性細胞因子在脂肪組織內(nèi)同樣有大量的表達和分泌，尤其是體循環(huán)中約三分之

4、一的IL-6均來自于脂肪組織，因此這部分細胞因子又被稱為脂肪細胞因子(adipocytokines)?？傊?，不論是“炎癥”假說還是“脂毒性”假說，均離不開對脂肪組織功能的研究，脂代謝異常和脂肪內(nèi)分泌紊亂在肥胖、胰島素抵抗和2型糖尿病的發(fā)病過程中扮演著非常重要的角色。 對脂代謝和脂肪細胞因子的研究中，血漿游離脂肪酸(freefattyacids，F(xiàn)FA)，TNF-α和IL-6的濃度升高被認為與胰島素抵抗或T2DM的發(fā)病密切相關，但

5、這方面的多數(shù)研究是在急性條件下應用藥理劑量的FFA、TNF-α或IL-6對受試對象作用的結果，而對胰島素抵抗或2型糖尿病患者血漿FFA、TNF-α和IL-6濃度在發(fā)病前后如何變化的研究卻很少，本研究擬動態(tài)觀察大鼠胰島素抵抗發(fā)生前后血漿FFA、TNF-α和IL-6的濃度變化特征，以期闡明血漿FFA、TNF-α和IL-6與胰島素抵抗之間可能的因果關系。 目的以高脂飲食飼養(yǎng)大鼠，在誘導大鼠胰島素抵抗發(fā)生的過程中，動態(tài)監(jiān)測血漿中TNF-

6、α、IL-6和FFA的濃度變化情況，研究其與大鼠胰島素抵抗之間可能存在的因果關系。 方法以高脂飼料和普通飼料分別喂養(yǎng)2組大鼠，共28天。飼養(yǎng)過程中不限制大鼠飲食，于每日上午8時稱取各籠飼料消耗量，每7天經(jīng)禁食12小時后測量體重一次，尾部末梢采取血樣約1.0ml；尾套法測量血壓，采血后立即進行血糖測定，剩余血樣經(jīng)離心后，將上清液保存于—70℃冰箱，實驗結束后進行統(tǒng)一檢測，血漿胰島素、TNF-α、IL-6均采用液相競爭放射免疫法檢測

7、，F(xiàn)FA以銅顯色法進行檢測。 主要實驗結果1.血糖、血漿胰島素、胰島素抵抗指數(shù)變化特點實驗期間各組動物空腹血糖均無明顯變化，組內(nèi)和組間比較均無統(tǒng)計學差異；高脂飼料組空腹血漿胰島素水平在第3周開始明顯升高與普通飼料組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，胰島素抵抗指數(shù)亦在第3周開始與普通飼料組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，而普通飼料組無明顯變化。 2.血漿FFA的濃度變化特點高脂飼料組空腹血漿FFA濃度在第3周開始與普通飼

8、料組比較有升高(P＜0.01)；以高脂飼料組每周的空腹血漿FFA和胰島素濃度進行線性相關分析顯示二者呈明顯的正相關關系(r=0.53P＜0.01)，而空腹血漿FFA濃度和胰島素抵抗指數(shù)之間亦呈正相關關系(r=0.34P＜0.01)。 3.血漿IL-6和TNF-α的濃度變化特點在高脂飼料組和普通飼料組中空腹血漿IL-6濃度均從第3周開始明顯有升高，組內(nèi)比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05，普通組；P＜0.01，高脂組)，但組間比較升高幅

9、度無統(tǒng)計學差異。而對各組大鼠每周的IL-6濃度與體重線性相關分析發(fā)現(xiàn)二者之間呈正相關關系(普通組r=0.48P＜0.05和高脂組r=0.45P＜0.01)；而高脂飼料和普通飼料組大鼠空腹血漿TNF-α濃度在實驗過程中無明顯變化，組間及組內(nèi)比較均無統(tǒng)計學差異； 結論：1.高脂飲食下血漿FFA與空腹胰島素濃度升高關系密切，與胰島素抵抗指數(shù)呈正相關關系，但本實驗中三者在同一時期升高，因此尚難分清其間的因果關系。 2.高脂飲食大