Novaferon對(duì)LPS介導(dǎo)的單核細(xì)胞分泌TNF-α及其相關(guān)信號(hào)因子的影響以及對(duì)克軳恩病患者療效觀察.pdf

1、目的:觀察Novaferon在體外對(duì)LPS介導(dǎo)的克羅恩病患者單核細(xì)胞分泌TNF-α的影響及其相關(guān)信號(hào)分子TRAF-6、JNK、p38、ERK、NF-κB、IRF-3、AP-1(Fos)mRNA表達(dá)的影響。
　　 方法:分離30例克羅恩病患者外周血單核細(xì)胞并進(jìn)行體外培養(yǎng)，分五組進(jìn)行體外實(shí)驗(yàn):A為空白對(duì)照組，B為單純LPS刺激組，C為L(zhǎng)PS與Novaferon同時(shí)加入組，D為先加入LPS刺激，后加入Novaferon組，E為先加入N

2、ovaferon，后加入LPS刺激組。在進(jìn)行LPS刺激及Novaferon干預(yù)后檢測(cè)培養(yǎng)液內(nèi)TNF-α濃度（ELISA法），最后采用RT-PCR方法檢測(cè)單核細(xì)胞內(nèi)TRAF-6、JNK、p38、ERK、NF-κB、IRF-3、AP-1(Fos)信號(hào)因子mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果:體外培養(yǎng)的克羅恩病患者單核細(xì)胞能分泌少量TNF-α(442.9925±10.4656 pg/ml)，加入LPS刺激后，TNF-α的分泌明顯增加（1261.

3、5290±31.1830 pg/ml），在LPS刺激后再加入Novaferon，TNF-α的分泌明顯減少(1261.5290±31.1830pg/ml vs850.1201±21.0327pg/m1，p＜0.01)，下降約32.60％。而Novaferon在LPS刺激前或與LPS同時(shí)加入培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)時(shí)，對(duì)TNF-α分泌無(wú)影響（1261.5290±31.1830 pg/ml vs1231.1363±34.8911pg/ml,p＞0.05;1

4、261.5290±31.1830pg/ml vs1256.2032±29.9132pg/ml，p＞0.05）。RT-PCR檢測(cè)表明，Novaferon能夠下調(diào)提前經(jīng)LPS刺激的單核細(xì)胞TLR4信號(hào)通路中TRAF-6(0.1824±0.0346 vs0.1033±0.0225,p＜0.01)、 JNK(0.4552±0.0598 vs0.2567±0.0364,p＜0.01)、 ERK(0.3955±0.0539 vs0.1839±0.0

5、269 p＜0.01)、 p38(0.5032±0.0499vs0.2842±0.0294, p＜0.01)、 NF-κB(0.4994±0.0604 vs0.2829±0.0365 p＜0.01) mRNA表達(dá)，而對(duì)AP-1(Fos)(0.6547±0.0395 vs0.6913±0.0223 p＞0.05)、 IRF-3(0.5396±0.0514 vs0.5427±0.0512 p＞0.05) mRNA表達(dá)無(wú)影響。對(duì)于未提前經(jīng)LP