GPX3基因與胰腺癌化療耐藥相關性的實驗研究.pdf

1、腫瘤細胞對化療藥物的耐受現(xiàn)象是影響胰腺癌化療效果的重要因素之一。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，活性氧族(reactive oxygen species，ROS)可能在腫瘤耐藥中發(fā)揮著重要作用。ROS是具有很高活性的氧代謝物，包括H<,2>O<,2>、超氧化自由基(O<,2><'->·)和羥基自由基(OH·)等多種物質(zhì)。高濃度的ROS具有細胞毒性作用。細胞內(nèi)的ROS是否利于腫瘤產(chǎn)生耐藥還存有爭議。 哺乳動物的細胞中，主要存在三種類型的抗氧化酶

2、：超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(catalase)和過氧化物酶(peroxidase)，它們具有清除細胞內(nèi)ROS的作用。谷胱甘肽過氧化物酶可以清除活細胞內(nèi)過氧化物，在保護細胞免受自由基損傷過程中起著關鍵作用。細胞內(nèi)的脂類容易和自由基發(fā)生反應，產(chǎn)生脂類過氧化物。谷胱甘肽過氧化物酶可以利用還原型谷胱甘肽(GSH)還原脂類過氧化物，從而消除自由基的毒害作用，有力地減少抗癌藥物的損害。谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)幾乎在所有組織中都有分布

3、，它有多種亞型，其中GPX3是細胞外型。 本實驗室在前期的研究工作中通過基因芯片技術發(fā)現(xiàn)，GPX3基因的表達水平可能與胰腺癌細胞的耐藥性密切相關。目前國內(nèi)外文獻尚未見GPX3對胰腺癌細胞化療耐藥性的影響的相關報道。 本研究中，我們采用實時熒光半定量RT-PCR、Western blot等方法檢測GPX3基因在人胰腺癌細胞株中的表達情況，以驗證前期基因芯片檢測結果。結果發(fā)現(xiàn)：在人胰腺癌細胞株SWl990及其三株耐藥株Sl9

4、90/Fu、SWl990/ADM、SWl990/GEM中，GPX3在mRNA水平均較親本株有不同程度的升高，分別為親本株的1.81、2.5l、3.43倍；在蛋白水平分別為0.94、1.78、2.58倍。在進一步的實驗中，我們通過RNAi技術下調(diào)胰腺癌細胞GPX3基因表達，觀察GPX3在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平的改變對人胰腺癌細胞株耐藥性的影響。結果發(fā)現(xiàn)：采用RNA干擾技術抑制胰腺癌細胞GPX3基因表達后，各細胞株GPX3在mRNA水平和蛋白水平均