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1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文不同維甲類化合物對人胰腺癌細胞株JF305生長抑制作用的比較姓名:張紅軍申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):外科學(xué)指導(dǎo)教師:郭克建20000301材料和方法人胰腺癌細胞株JF一305(由中國醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所提供)在100%濕度,5%CO。,37℃條件下培養(yǎng)于10%小牛血清的RP—MI一1640培養(yǎng)液中,單層傳代培養(yǎng)。收集對數(shù)生長期細胞使之濃度為25104/ml,以每孔100tl(細胞接種量為25103)接種于96孔培養(yǎng)板。
2、設(shè)定為四個實驗用藥組,一個陰性對照組和一個本底對照組。用藥組分別加入藥物濃度為10_5mol/L的四種藥物(9cis—RA,13cisRA,ATRA及R040—8757)各100tll,總?cè)萘繛?00tl。陰性對照組加入100p1培養(yǎng)液。本底對照組加入2001培養(yǎng)液。設(shè)每組8復(fù)孔。將96孔板在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24,48,72,96,120小時,分別更換培養(yǎng)液后加入50txlMTT(1mg/m1),繼續(xù)于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4小時后棄去上清,加150
3、tlDMSO震蕩溶解30分鐘。用酶標(biāo)儀在波長492nm測吸光度A值,計算生長抑制率(CI一(陰性對照組A值一用藥組A值)/(陰性對照組A值一本底組A值)100%)。將用藥組8復(fù)孔的光密度值取均值及標(biāo)準(zhǔn)差;用藥組與陰性對照組光密度值進行配對t檢驗,計算得出t值。結(jié)果由于t350,故po01。用藥組與陰性對照組在統(tǒng)計學(xué)上有顯著差異。9cisRA,13一cisRA及ATRA生長抑制率在96小時達到峰高,分別為4805%,5268%及5067%
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