大鼠肝卵圓細胞體外誘導轉(zhuǎn)化及其相關分子機制的初步探討.pdf

1、中山大學碩士學位論文大鼠肝卵圓細胞體外誘導轉(zhuǎn)化及其相關分子機制的初步探討答辯委員會主席：答辯委員會委員：碩士生：丁燕娜專業(yè)：病理學導師：薛玲教授啼丫’廠一，●vj∽釃■√一翳～吃一『淅娩晦◇秒㈨大鼠肝卵圓細胞體外誘導轉(zhuǎn)化及其相關分子機制的初步探討卵圓細胞的胞外微環(huán)境如細胞表達的粘附分子、細胞外基質(zhì)連接蛋白的種類以及細胞間縫隙連接信息交流(GJIC)均與卵圓細胞向肝癌細胞轉(zhuǎn)化有密切的關系。腫瘤壞死因子、表皮生長因子(EGFR)、轉(zhuǎn)化生長因

2、子(TGFn)等細胞因子及相關受體的表達異常在卵圓細胞轉(zhuǎn)化和增殖過程中也發(fā)揮了關鍵的作用。將卵圓細胞應用于臨床的替代治療，即利用干細胞移植和／或干細胞工程生產(chǎn)出肝細胞來治療各種肝病是我們研究卵圓細胞這種肝內(nèi)干細胞的最終目的。然而由于卵圓細胞具備多樣的生物學潛能，且與肝細胞及肝癌細胞間存在著復雜的內(nèi)在聯(lián)系，當其在體內(nèi)的分化過程控制不當，將有可能適得其反導致肝細胞性或膽管細胞性肝癌的發(fā)生。因此，如何調(diào)控其正常分化，并抑制其惡性轉(zhuǎn)化成為應用卵

3、圓細胞之前必須要解決的關鍵問題。把握卵圓細胞分化和轉(zhuǎn)化的機制，對于卵圓細胞的實際應用將有關鍵性的作用，同時對理解肝癌的發(fā)生機理也有重要的意義。然而，經(jīng)過數(shù)十年的探討，關于卵圓細胞分化、轉(zhuǎn)化調(diào)控的機制至今仍不十分清楚。其在何種條件下向正常方向分化何種條件下發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化兩者各自有著怎樣的發(fā)生機制至今尚無統(tǒng)一而全面的認識。針對以上研究現(xiàn)狀，我們試圖通過體外誘導卵圓細胞轉(zhuǎn)化，動態(tài)觀察卵圓細胞轉(zhuǎn)化過程中其生物學特征，基因表達及代謝酶表達的情況，并

4、借助高通量、簡便快捷的分子遺傳學分析技術探求調(diào)控卵圓細胞轉(zhuǎn)化的關鍵因子，以期對卵圓細胞惡性轉(zhuǎn)化機制獲得一個比較全面的認識，從而有助于我們深入了解肝臟腫瘤的發(fā)生機理。實驗目的：試圖采用化學致癌劑MNNG體外間斷誘導卵圓細胞惡性轉(zhuǎn)化，檢測轉(zhuǎn)化過程中細胞的一般生物學特點，以及基因和蛋白質(zhì)表達上的變化情況，以進一步驗證卵圓細胞與肝癌發(fā)生的關系，并了解卵圓細胞轉(zhuǎn)化的分子機制，以期對肝臟的發(fā)生學和肝癌的癌變機制提供實驗依據(jù)。實驗方法：復蘇肝卵圓細胞