Hca-F欖香稀復(fù)合瘤苗抗原—卡介苗熱休克蛋白復(fù)合物（H-,TA--HSP70-,BCG-）對(duì)小鼠樹突狀細(xì)胞的活化作用.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)室分別制備欖香稀復(fù)合瘤苗抗原(H<,TA>)與卡介苗HSP70(HSP70<,BCG>0),構(gòu)建H<,TA>-HSP70<,BCG>復(fù)合物,免疫小鼠后對(duì)H<,TA>的攻擊具有明顯的保護(hù)效應(yīng).該實(shí)驗(yàn)用H<,TA>-HSP70<,BCG>在外沖擊DC,觀察H<,TA>-HSP70<,BCG>對(duì)DC的沖激作用及其抗原提呈功能的影響,探討腫瘤抗原-HSP70<,BCG>瘤苗誘導(dǎo)抗瘤免疫的機(jī)制.方法:無菌取小鼠臟、骨髓制成細(xì)胞懸液,破紅細(xì)胞

2、,用含有GM-CSF和IL-4(濃度為100ng/ml)的1640培養(yǎng)基調(diào)成所需濃度2*10<,7>ml.37℃,5﹪CO<,2>培養(yǎng)2個(gè)小時(shí).洗掉不黏附細(xì)胞后黏附細(xì)胞終結(jié)培養(yǎng)16-18小時(shí).將培養(yǎng)的粘附細(xì)胞用1640培養(yǎng)基(不含血清)沖洗,洗出半粘附細(xì)胞,即富含樹突狀細(xì)胞的細(xì)胞組分簡稱突狀細(xì)胞.正常小鼠脾、骨髓DC在體外用H<,TA>-HSP70<,BCG>、H<,TA>、HSP70<,BCG>進(jìn)行刺激繼續(xù),培養(yǎng)3天.用MTT法測DC