選擇性環(huán)氧合酶-2抑制劑塞來昔布用于食管腺癌化學(xué)預(yù)防的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[目的]在大鼠酸和十二指腸液混合反流動(dòng)物模型的基礎(chǔ)上,通過體內(nèi)和體外的途徑,對(duì)選擇性COX-2抑制劑塞來昔布用于食管腺癌化學(xué)預(yù)防的可行性進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性探討.[方法]1.大鼠混合反流動(dòng)物模型的建立和COX-2表達(dá)的免疫組化檢測.6周齡雄性SD大鼠80只,隨機(jī)分為反流模型組(n=60)和無反流組(n=20),術(shù)前適應(yīng)環(huán)境2周.通過胃空腸吻合+食管空腸吻合術(shù)建立大鼠酸和十二指腸液混合反流動(dòng)物模型,無反流組僅行單純剖腹術(shù).術(shù)后28周取食管全長,縱向

2、剖開,肉眼觀察病變,如發(fā)現(xiàn)腫瘤,則測量其最大三維尺寸,包括:寬度、從黏膜到外表面的深度和縱向跨度.于模型組和無反流組各隨機(jī)選取8例食管標(biāo)本,縱向切取2條各寬約1mm的食管組織(如有腫瘤或化生表現(xiàn),應(yīng)包含腫瘤或化生組織)于液氮中速凍后凍存于-70℃冰箱,以備檢測環(huán)氧合酶-1(COX-1)和COX-2表達(dá)以及前列腺素E2(PGE2)含量.將剩余食管組織標(biāo)本制成石蠟切片,蘇木精-伊紅染色后行病理組織學(xué)檢查,同時(shí)行免疫組化染色檢測COX-2的表

3、達(dá).2.大鼠Barrett's食管體外器官培養(yǎng)實(shí)驗(yàn).選取模型組具有典型Barrett's食管外觀的標(biāo)本,通過吻合口縫線判斷吻合口位置,將吻合口食管側(cè)1mm以遠(yuǎn)的組織切除,然后仔細(xì)剝離食管下端形狀不規(guī)則的淡紅色黏膜,縱行切取少量剝離的黏膜組織行病理組織學(xué)檢查以確認(rèn)Barrett's食管,剩余Barrett's黏膜組織于體外進(jìn)行24h器官培養(yǎng).分別觀察其暴露于酸、膽鹽、塞來昔布、酸+塞來昔布和膽鹽+塞來昔布1h對(duì)其組織活力以及COX-2和增