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1、目的:探討脂氧合酶抑制劑對HepG2細胞增殖及凋亡的影響及其相關(guān)機制?! 》椒ǎ后w外培養(yǎng)HepG2肝癌細胞,應(yīng)用不同濃度脂氧合酶抑制劑去甲二氫愈創(chuàng)木酸(NDGA)處理HepG2細胞,利用MTT比色法、生長曲線、細胞克隆形成試驗觀察NDGA對HepG2細胞的增殖作用,HE染色、流式細胞術(shù)觀察細胞凋亡并行細胞周期分析,細胞免疫化學(xué)或westernblot技術(shù)測定Caspase-3、PCNA、野生型p53(wtp53)、c-erbB-2蛋白
2、表達水平變化?! 〗Y(jié)果:NDGA對HepG2細胞具有明顯的生長抑制作用,不同濃度的NDGA(50、100、150、200)μmol/L處理HepG2細胞72h的抑制率分別為(27.34±5.95)%、(41.76±7.47)%、(57.08±4.36)%和(69.17±4.42)%,其IC50值為109.13μmol/L。細胞克隆形成率分別為(21.63±0.70)%、(17.33±0.96)%、(12.53±0.45)%、(7.97
3、±0.92)%,明顯低于對照組的(31.70±0.62)%,(P<0.01)。同時,流式細胞術(shù)顯示NDGA可誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡并使細胞周期被阻滯于G1期,NDGA(0、50、100、150、200)μmol/L作用HepG2細胞72h后,對照處理組(0μmol/L)沒有出現(xiàn)凋亡峰,其余各組(50、100、150、200)μmol/L均有凋亡出現(xiàn),其凋亡率分別為(3.00±0.57)%,(6.38±0.40)%,(11.2±1.10)
4、%,(14.2±4.95)%,(P<0.01)。細胞免疫化學(xué)、Westernblot分析顯示NDGA對HepG2細胞的PCNA、c-erbB-2蛋白表達有抑制作用,并可促進Caspase-3、wtp53蛋白的表達?! 〗Y(jié)論: (1)NDGA可抑制HepG2肝癌細胞的增殖,使其生長阻滯于G1期,并具有時間、劑量依賴性。 (2)NDGA可誘導(dǎo)HepG2肝癌細胞凋亡。 (3)NDGA對HepG2肝癌細胞增殖抑制和誘導(dǎo)凋亡作用與上
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