研究ADSCs聯(lián)合BMP-2治療幼年兔股骨頭骺壞死的效果.pdf

1、目的:探討股骨頭骺鉆孔后ADSCs聯(lián)合BMP-2治療幼年兔股骨頭骺缺血壞死的效果。
　　方法:1、細胞實驗部分:將凍存的二代ADSCs復蘇、傳代后用BrdU標記，并將標記的ADSCs行MTT試驗、成骨誘導及茜素紅染色試驗;2、動物實驗部分:將45只幼年新西蘭兔隨機均分為5組并破壞左側股骨頭骺血供制備Perthes病動物模型。造模后2周，A組:予以假手術作為股骨頭骺缺血壞死組，B組:予以鉆孔;C組:鉆孔后移植入ADSCs;D組:鉆孔

2、后注入BMP-2;E組:鉆孔后注入ADSCs及BMP-2。于造模后4、6、10周活體行MRI檢查、取材后觀察各組股骨頭骺外觀、并行X線檢查，組織切片HE染色后進行光鏡觀察，免疫熒光染色檢測，結果進行相關分析。
　　結果:1、細胞試驗部分:①ADSCs傳代培養(yǎng)生長良好，無自發(fā)分化現(xiàn)象。②約有90％的ADSCs被BrdU標記;且具有良好的增殖與成骨分化能力。2、動物實驗部分:①X-ray檢測:造模后6周，C、D、E組股骨頭骺商較A、B

3、組大(P＜0.05);10周時，D組優(yōu)于A、B組(P＜0.05):而C、E組顯著優(yōu)于A、B組(P＜0.01)。②MR檢測:A、B組造模后6周、10周時股骨頭骺均出現(xiàn)點狀或片狀低信號壞死灶，髖關節(jié)間隙增寬，C、D、E組造模后4周、6周時股骨頭骺內(nèi)主要為混雜信號，髖關節(jié)結構良好，10周時，C、E組股骨頭骺內(nèi)信號均勻且髖關節(jié)結構良好，而D組股骨頭骺內(nèi)信號稍混雜，髖關節(jié)間隙增寬。③組織形態(tài)學觀察:C、D、E組骨小梁面積在造模后4周時較A、B組高

4、(P＜0.05)，6周、10周時，D組骨小梁面積仍優(yōu)于A、B組(P＜0.05)，而C、E組明顯優(yōu)于A、B組(P＜0.01)。各組生長板的厚度均無明顯差異(P＞0.05)。④C組和E組的組織切片進行免疫熒光檢測:移植細胞2周時，股骨頭骺內(nèi)間質(zhì)可見廣泛分布的BrdU陽性的細胞，而骨小梁內(nèi)未見陽性細胞，4周、8周時，發(fā)現(xiàn)骨小梁內(nèi)有BrdU陽性細胞。
　　結論:對于血管損傷所致的幼年兔股骨頭骺缺血性壞死，經(jīng)過生長板鉆孔并予以ADSCs聯(lián)合