研究ADSCs聯(lián)合BMP-2治療幼年兔股骨頭骺壞死的效果.pdf

1、目的:探討股骨頭骺鉆孔后ADSCs聯(lián)合BMP-2治療幼年兔股骨頭骺缺血壞死的效果。
　　方法:1、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)部分:將凍存的二代ADSCs復(fù)蘇、傳代后用BrdU標(biāo)記，并將標(biāo)記的ADSCs行MTT試驗(yàn)、成骨誘導(dǎo)及茜素紅染色試驗(yàn);2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:將45只幼年新西蘭兔隨機(jī)均分為5組并破壞左側(cè)股骨頭骺血供制備Perthes病動(dòng)物模型。造模后2周，A組:予以假手術(shù)作為股骨頭骺缺血壞死組，B組:予以鉆孔;C組:鉆孔后移植入ADSCs;D組:鉆孔

2、后注入BMP-2;E組:鉆孔后注入ADSCs及BMP-2。于造模后4、6、10周活體行MRI檢查、取材后觀(guān)察各組股骨頭骺外觀(guān)、并行X線(xiàn)檢查，組織切片HE染色后進(jìn)行光鏡觀(guān)察，免疫熒光染色檢測(cè)，結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析。
　　結(jié)果:1、細(xì)胞試驗(yàn)部分:①ADSCs傳代培養(yǎng)生長(zhǎng)良好，無(wú)自發(fā)分化現(xiàn)象。②約有90％的ADSCs被BrdU標(biāo)記;且具有良好的增殖與成骨分化能力。2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)部分:①X-ray檢測(cè):造模后6周，C、D、E組股骨頭骺商較A、B

3、組大(P＜0.05);10周時(shí)，D組優(yōu)于A、B組(P＜0.05):而C、E組顯著優(yōu)于A、B組(P＜0.01)。②MR檢測(cè):A、B組造模后6周、10周時(shí)股骨頭骺均出現(xiàn)點(diǎn)狀或片狀低信號(hào)壞死灶，髖關(guān)節(jié)間隙增寬，C、D、E組造模后4周、6周時(shí)股骨頭骺?jī)?nèi)主要為混雜信號(hào)，髖關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)良好，10周時(shí)，C、E組股骨頭骺?jī)?nèi)信號(hào)均勻且髖關(guān)節(jié)結(jié)構(gòu)良好，而D組股骨頭骺?jī)?nèi)信號(hào)稍混雜，髖關(guān)節(jié)間隙增寬。③組織形態(tài)學(xué)觀(guān)察:C、D、E組骨小梁面積在造模后4周時(shí)較A、B組高

4、(P＜0.05)，6周、10周時(shí)，D組骨小梁面積仍?xún)?yōu)于A、B組(P＜0.05)，而C、E組明顯優(yōu)于A、B組(P＜0.01)。各組生長(zhǎng)板的厚度均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。④C組和E組的組織切片進(jìn)行免疫熒光檢測(cè):移植細(xì)胞2周時(shí)，股骨頭骺?jī)?nèi)間質(zhì)可見(jiàn)廣泛分布的BrdU陽(yáng)性的細(xì)胞，而骨小梁內(nèi)未見(jiàn)陽(yáng)性細(xì)胞，4周、8周時(shí)，發(fā)現(xiàn)骨小梁內(nèi)有BrdU陽(yáng)性細(xì)胞。
　　結(jié)論:對(duì)于血管損傷所致的幼年兔股骨頭骺缺血性壞死，經(jīng)過(guò)生長(zhǎng)板鉆孔并予以ADSCs聯(lián)合