脊柱軟骨終板細(xì)胞凋亡與椎間盤退變關(guān)系的研究.pdf

1、背景和目的： 頸椎病是一種常見病和多發(fā)病，許多學(xué)者都致力于對其發(fā)病機(jī)制的研究。近年來，有些學(xué)者認(rèn)為，椎間盤細(xì)胞會發(fā)生凋亡，但是對其在此過程中的病理意義知之甚少。另一方面，隨著年齡的發(fā)展，軟骨終板的厚度會逐漸減少，直至消失，其與年齡間的關(guān)系尚未清楚。通過建立脊柱退變的動物模型，探討脊柱軟骨終板細(xì)胞凋亡與頸椎間盤退變之間的關(guān)系，確定凋亡在其退變過程中的意義，為從根本上防止和治療頸椎病提供新的思路。 方法： 選取健康大

2、白鼠24只，隨機(jī)分為實驗組和對照組。實驗組沿C1-C7棘突做正中切口，剝離椎旁肌，切除C1-C7的棘上、棘間韌帶及兩側(cè)關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)后外1/2，誘發(fā)脊柱加速退變；對照組僅切開皮膚后縫合。分別于9周、18周、36周對兩組動物施行過度麻醉處死，完整取下包含上下椎體的椎間盤。對頸椎標(biāo)本行矢狀位切片，分離軟骨終板和椎間盤。頸椎間盤按Thompson椎間盤退變病理分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級評定。將軟骨終板石蠟包埋，切片。做HE染色和Tunnel染色。計數(shù)椎間盤

3、軟骨終板凋亡數(shù)量，評估軟骨終板消失狀況。 結(jié)果： 1．頸椎間盤退變的組織學(xué)表現(xiàn)HE染色切片，評估椎間盤退變程度。9周對照組大鼠頸椎間盤組織結(jié)構(gòu)基本正常。而9周手術(shù)組大鼠頸椎間盤出現(xiàn)輕度退變表現(xiàn)，纖維環(huán)前緣軟骨組織增生，排列有輕度不規(guī)則表現(xiàn)，髓核偏向后方，椎體邊緣光滑。18周對照組大鼠頸椎間盤與9周對照組基本相似，髓核皺縮，纖維環(huán)出現(xiàn)裂隙。18周手術(shù)組大鼠頸椎間盤退變明顯，纖維環(huán)部分纖維化，纖維環(huán)和髓核分界不明顯，椎體前后

4、緣有骨贅形成。36周對照組大鼠頸椎間盤與18周相比退變明顯，36周手術(shù)組動物經(jīng)椎間盤嚴(yán)重退變，纖維環(huán)完全纖維化，髓核消失，椎體前后緣骨贅明顯。 2．HE染色觀察頸椎間盤細(xì)胞凋亡狀況隨著年齡增長，退變進(jìn)展，軟骨終板形態(tài)學(xué)變化顯著，退變隨時間加速。軟骨終板的結(jié)構(gòu)隨年齡逐漸退變。早期和術(shù)后早期不明顯，對照組頸椎間盤軟骨終板較厚，可見少量散在分布的軟骨陷窩；術(shù)后9周對照組和實驗組終板結(jié)構(gòu)都出現(xiàn)局部消失，細(xì)胞密度變低，可見散在分布的凋亡軟

5、骨細(xì)胞和凋亡小體。術(shù)后18周會出現(xiàn)顯著退變，終板消失顯著。 3．TUNEL染色比較對照組和實驗組軟骨終板內(nèi)細(xì)胞凋亡率(TUNEL陽性細(xì)胞率)盡管前期軟骨終板內(nèi)也存在少量凋亡，但是凋亡主要發(fā)生在18周以后。通過照片我們可以發(fā)現(xiàn)，9周對照組和實驗組軟骨終板內(nèi)凋亡細(xì)胞幾乎不可見。而18周時這種情況就發(fā)生了變化，對照組和實驗組出現(xiàn)了明顯差別，實驗組與對照組相比，凋亡細(xì)胞明顯增多。36周情況又有所不同，對照組和實驗組凋亡細(xì)胞數(shù)量都比較多，