ELISA檢測(cè)試劑的評(píng)價(jià)方法.pdf

1、ELISA檢測(cè)試劑的評(píng)價(jià)在ELISA試劑的研制和應(yīng)用中都有重要的意義。國(guó)內(nèi)外對(duì)試劑的評(píng)價(jià)缺乏系統(tǒng)化，特別是對(duì)一些專用的評(píng)價(jià)方法使用較少，多數(shù)試驗(yàn)主要圍繞的僅僅是檢測(cè)的敏感性和特異性。這種方法對(duì)于彼此間檢測(cè)結(jié)果差異很大的試劑，可以反映檢測(cè)試劑的優(yōu)劣，但是當(dāng)彼此檢測(cè)結(jié)果相近的時(shí)候，將難于篩選出性能更優(yōu)良的檢測(cè)試劑。 要解決這個(gè)問題就要使用更多的檢測(cè)試劑評(píng)價(jià)方法。經(jīng)過查閱和參考相關(guān)書籍和文獻(xiàn)，本研究選擇了δ值和log(C．O．I．)頻

2、數(shù)分布圖用于考察試劑檢測(cè)結(jié)果數(shù)據(jù)分布情況，Kappa值檢驗(yàn)方法用于兩組計(jì)數(shù)型資料的一致性比較，ROC曲線分析方法用于檢測(cè)試劑的診斷效能進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。通過以上的分析方法可以更加深入的評(píng)價(jià)試劑間的內(nèi)在差異，從而篩選出更為優(yōu)質(zhì)的檢測(cè)試劑用于我們的日常檢測(cè)工作。 本文選用乙型肝炎病毒ELISA檢測(cè)試劑作為評(píng)價(jià)對(duì)象，從市場(chǎng)上購(gòu)買了四種國(guó)內(nèi)品牌診斷試劑，分別對(duì)乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(antiHBs)、乙肝核心抗體(anti

3、HBc)三個(gè)肝炎血清學(xué)標(biāo)記進(jìn)行檢測(cè)試驗(yàn)。檢測(cè)樣本選擇了國(guó)家乙肝血清學(xué)診斷參考品63份和醫(yī)院門診未知血清323份。試驗(yàn)過程在標(biāo)準(zhǔn)操作程序下完成，分別對(duì)兩類血清進(jìn)行了金標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定。 使用SAS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，從不同的角度分析了四種檢測(cè)試劑的檢測(cè)效能。結(jié)果如下：已知參考品試驗(yàn)部分： 1．四種國(guó)內(nèi)乙肝表面抗原ELISA檢測(cè)試劑對(duì)國(guó)家最低檢出限靈敏度參考血清都有很好的檢出能力。 2．乙肝表面抗原高值血清有良好

4、的檢出能力，雖然在部分高值血清存在“Hook”效應(yīng)，但對(duì)于定性檢測(cè)試驗(yàn)并不影響檢測(cè)結(jié)果。 3．四種試劑的乙肝表面抗原批內(nèi)精密度檢測(cè)中，B試劑具有良好的精密性，而A則遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了15％的最大參考精密性限值，表面A試劑在批內(nèi)精密性上存在較大缺陷。 4．乙肝表面抗原檢測(cè)常用評(píng)價(jià)指標(biāo)分析提示，A和B具有相同的診斷效能，高于C和D的診斷效能。 5．四種試劑乙肝表面抗原檢測(cè)的劑量反應(yīng)線性關(guān)系分析中，應(yīng)用冪函數(shù)擬合的直線回歸方

5、程都有顯著性的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，經(jīng)殘差分析顯示，四種試劑的回歸方程有很好的實(shí)用效能。 6．乙肝表面抗原6值和10g(C．0．I．)頻數(shù)圖分析可見，A和B試劑的結(jié)果優(yōu)于C和D。 未知樣本分析部分： 1．常用評(píng)價(jià)指標(biāo)分析顯示，四種檢測(cè)試劑對(duì)乙肝表面抗原的檢測(cè)效能最佳，對(duì)表面抗體和核心抗體的檢測(cè)效能則明顯較低。B試劑在四種試劑中的對(duì)三項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)效能是最好的。 2．通過Kappa值檢驗(yàn)的一致性分析顯示，四種試劑與進(jìn)口

6、羅氏肝炎診斷試劑都具有一致性，其中乙肝表面抗原有非常好的一致性，核心抗體試劑的一致性次之，表面抗體檢測(cè)的一致性最差。 3．經(jīng)過試劑檢測(cè)結(jié)果的數(shù)據(jù)分布分析，對(duì)乙肝表面抗體指標(biāo)的檢測(cè)中，B試劑一如在參考品樣本的檢測(cè)中一樣具有很好的檢測(cè)效能。對(duì)乙肝表面抗體和核心抗體檢測(cè)中，B試劑依然表現(xiàn)了良好的陰陽性標(biāo)本區(qū)分能力。 4．在經(jīng)ROC曲線分析四種檢測(cè)試劑的檢測(cè)結(jié)果后，B試劑在乙肝表面抗原、表面抗體和核心抗體三項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)中，均優(yōu)于