水稻種胚脂氧合酶-3（LOX-3）基因的精細(xì)定位.pdf

1、一般條件下，稻谷儲(chǔ)藏兩年后就開始陳化變質(zhì)。隨著儲(chǔ)藏環(huán)境溫度和濕度的自然上升，陳化進(jìn)程迅速加快。據(jù)統(tǒng)計(jì)，每年我國(guó)作為糧食和種子儲(chǔ)藏的稻谷因?yàn)殛惢瘑栴}會(huì)損失5％。選擇合適的包裝材料、微波處理以及較低的儲(chǔ)藏溫度、濕度和適宜的密閉環(huán)境是保持儲(chǔ)藏稻谷品質(zhì)的主要外在條件，而建設(shè)高標(biāo)準(zhǔn)的低溫庫(kù)、氣調(diào)庫(kù)則會(huì)極大地消耗能源和資源。因此，從水稻品種本身來解決稻谷儲(chǔ)藏期間的陳化變質(zhì)問題無疑是一條經(jīng)濟(jì)有效的途徑。 近年來的研究表明，脂質(zhì)氧化降解是導(dǎo)致稻

2、谷劣變和產(chǎn)生陳化氣味的主要原因。在水稻種胚脂氧合酶的總活性中占80-90％的脂氧合酶．3(LOX-3)，是稻谷儲(chǔ)藏期間脂質(zhì)氧化降解的關(guān)鍵酶，其缺失可顯著延緩稻谷的陳化，提高稻谷耐儲(chǔ)性。以水稻種胚LOX-3缺失體為材料，分析LOX-3基因的遺傳模式，并進(jìn)行基因的精細(xì)定位、圖位克隆，進(jìn)而研究基因的缺失機(jī)理，對(duì)于育成耐儲(chǔ)水稻新品種具有重要意義。前人的遺傳分析表明，水稻種胚LOX-3的缺失由單隱性基因控制。本研究對(duì)多個(gè)種胚LOX-3缺失體進(jìn)行了

3、等位性測(cè)驗(yàn)，并對(duì)種胚LOX-3基因進(jìn)行了精細(xì)定位，結(jié)果如下： 1、水稻種胚脂氧合酶．3(LOX-3)缺失的等位性測(cè)驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)室曾利用I<,2>-KI比色法，從來自4個(gè)地區(qū)的199份水稻材料中篩選出10個(gè)種胚LOX-3缺失材料。本研究將這10個(gè)材料與種胚LOX-3缺失體材料Daw Dam進(jìn)行雜交，用I<,2>-KI比色法檢測(cè)其后代種胚LOX-3的表型，發(fā)現(xiàn)它們的種胚LOX-3全部為缺失，初步證明這10個(gè)種胚LOX-3缺失體材料與Da

4、w Dam具有相同的種胚LOX-3缺失位點(diǎn)。 2、水稻種胚脂氧合酶-3(LOX-3)基因的精細(xì)定位利用水稻種胚LOX-3缺失體材料Daw Dam(favanica)和PL2(faponica)，分別與種胚I．OX-3正常品種IRBB7(indica)和9311(indica)構(gòu)建群體，分析LOX-3基因的遺傳模式，并對(duì)其進(jìn)行精細(xì)定位。 分別以Daw Dam/IRBB7 F<,2>群體的3044個(gè)單株以及PL2/9311

5、F<,2>群體的970個(gè)單株為材料，利用本實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的I<,2>-KI比色法從中篩選出種胚LOX-3缺失的個(gè)體，作為定位群體。 結(jié)合分子標(biāo)記，鑒定Daw Dam/IRBB7 F<,2>群體中641個(gè)種胚LOX-3缺失個(gè)體的基因型。經(jīng)過連鎖分析，將LOX-3基因定位于水稻第3染色體SSR標(biāo)記RM3405和碩士學(xué)位論文水稻種胚脂氧合酶-3(LOX-3)基因的精細(xì)定位SSR3-183之間，與兩標(biāo)記間的距離分別為0.46cM和0.15c