TGF-β通路基因遺傳變異與食管癌放療患者生存及放射性食管炎的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的:放射治療是食管鱗癌（esophageal squamous-cell carcinoma, ESCC）主要的有效治療手段之一，而具有相同臨床背景及治療方式的患者會出現(xiàn)不同的應(yīng)答，且在治療前臨床無法預(yù)測療效和與治療有關(guān)副反應(yīng)的級別。遺傳背景的不同可能是影響個體間預(yù)后和放療副反應(yīng)差異的重要因素。
　　本研究探討轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)通路基因遺傳變異與接受單純放療的

2、食管鱗癌患者總生存時(shí)間和放射性食管炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)，尋找潛在的能夠預(yù)測放療預(yù)后及副反應(yīng)的標(biāo)志物。
　　方法:應(yīng)用Sequenom Mass ARRAY平臺檢測296例在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院接受單純放療的食管鱗癌患者TGF-β通路12個基因功能區(qū)共45個htSNP位點(diǎn)的基因型，并分析其與患者總生存時(shí)間和放射性食管炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)。應(yīng)用Logistic回歸模型計(jì)算各基因型校正性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤分期、放療方式、總放療劑

3、量后的比值比(odd ratios,ORs)及其95％可信區(qū)間(confidence intervals，CIs);用Kaplan-Meier方法計(jì)算中位生存時(shí)間，并用Log-rank檢驗(yàn)分析生存時(shí)間的差異;以多因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型計(jì)算不同基因型患者的風(fēng)險(xiǎn)比(hazard ratios，HRs)及其95％ CIs，單因素Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析臨床參數(shù)對患者生存的影響。采用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)、PCR-RFLP實(shí)驗(yàn)、實(shí)時(shí)熒光定

4、量PCR實(shí)驗(yàn)、電泳遷移率變動實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行遺傳變異的功能研究。
　　結(jié)果:截至2014年6月隨訪，296例單獨(dú)放療食管癌患者中死亡260例，占病例總數(shù)的87.8％，生存36例，占12.2％。全組患者的中位生存時(shí)間(median survival time，MST)為14.0個月（2.0-148.0個月）。生存分析的結(jié)果顯示，Ⅱ期和Ⅳ期患者的MST分別為19.0和10.0個月，Ⅳ期患者的預(yù)后比Ⅱ期患者差，HR為1.97(95％ CI=1

5、.34-2.89，P＜0.001);總放療劑量≥60 Gy和＜60 Gy患者的中位生存時(shí)間分別為16.0和10.0個月，總放療劑量≥60 Gy患者的預(yù)后較好，HR為0.64(95％ CI=0.49-0.84，P=0.001)。與攜帶CYR61 rs2297140 A等位基因患者相比，攜帶C等位基因的患者死亡風(fēng)險(xiǎn)增高，校正HR是1.39（95％ CI=1.15-1.69，P＜0.001）。功能實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示CYR61 rs2297140 C

6、→A遺傳變異降低熒光素酶報(bào)告基因的表達(dá)活性，但該位點(diǎn)不同等位基因均不與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合。對83例食管癌患者的癌及配對癌旁組織進(jìn)行定量分析發(fā)現(xiàn)，攜帶AC及CC基因型的患者癌旁正常組織中CYR61mRNA表達(dá)明顯高于攜帶AA基因型的患者(P=0.028)，該基因在食管癌組織中的表達(dá)顯著高于癌旁組織(P＜0.001)。296例患者中，發(fā)生放射性食管炎160例，其中1級80例，2級66例，3級14例。分析發(fā)現(xiàn)4個遺傳變異即CYR61 rs95435

7、3、SDC2 rs17788084、SMA D2 rs1792678和SMAD3 rs8028147與放射性食管炎的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)顯著相關(guān)，加性模型計(jì)算的OR值分別為1.52(95％ CI=1.06-2.20，P=0.024)、0.51(95％ CI=0.30-0.89,P=0.017)、0.63(95％ CI=0.47-0.85，P=0.002)和0.68(95％ CI=0.49-0.95，P=0.025)。將上述位點(diǎn)進(jìn)行聯(lián)合分析發(fā)現(xiàn)，與攜

8、帶1-3個風(fēng)險(xiǎn)等位基因的低風(fēng)險(xiǎn)組比較，攜帶4-5個風(fēng)險(xiǎn)等位基因的中風(fēng)險(xiǎn)組和攜帶6-8個風(fēng)險(xiǎn)等位基因的高風(fēng)險(xiǎn)組的OR分別為1.94(95％ CI=1.26-2.97，P=0.003)和2.66(95％ CI=1.34-5.28，P=0.005)。不同風(fēng)險(xiǎn)組間食管炎發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)有顯著差異(Ptrend=0.006)，攜帶風(fēng)險(xiǎn)等位基因越多，食管癌患者接受放療后罹患放射性食管炎的風(fēng)險(xiǎn)越高。
　　結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)TGF-β通路CYR61 rs2