丹川紅吸收成分舒血管機(jī)理研究.pdf

1、目的:通過觀察丹川紅及其吸收成分FTA單用(Ferulic acid/阿魏酸、Tanshinol/丹參素和Hydroxysaffloryellow A/羥基紅花色素A)對大鼠離體胸主動脈環(huán)及大鼠胸主動脈內(nèi)皮細(xì)胞的作用，進(jìn)一步探討丹川紅的舒血管機(jī)理。
　　方法:建立UPLC-MS/MS方法對丹川紅及其灌胃大鼠吸收入血成分進(jìn)行分析測定。采用離體血管張力實(shí)驗(yàn)方法記錄丹川紅及其吸收成分單用對1μmol/L腎上腺素(PE)預(yù)收縮血管環(huán)張力變

2、化?；瘜W(xué)發(fā)光法測定丹川紅吸收成分對內(nèi)皮細(xì)胞一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)含量的影響。采用western印跡和RT-PCR法分析丹川紅吸收成分對內(nèi)皮細(xì)胞PI3K/AKT/eNOS信號通路的影響。
　　結(jié)果:
　　第一部分:丹川紅及其灌胃大鼠血漿中FTA能被同時(shí)檢測到并作為該方的體內(nèi)主要吸收活性成分(ABCs)。
　　第二部分:丹川紅及其三個吸收成分FTA對苯腎上腺素(PE)預(yù)收縮的離體大鼠胸主動脈環(huán)均有明顯的濃

3、度依賴性舒張效應(yīng)。DCH對完整和去內(nèi)皮主動脈環(huán)最大舒張分別為82±3％和76±2％(P＜0.01和P＜0.05)。F對完整和去內(nèi)皮主動脈環(huán)最大舒張分別為94±4％和85±3％（P＜0.01和P＜0.01）。T對完整和去內(nèi)皮主動脈環(huán)最大舒張分別為96±4％和9±1％(P＜0.01和P＞0.05)。A對完整和去內(nèi)皮主動脈環(huán)最大舒張分別為92±4％和81±2％(P＜0.01和P＜0.05)。
　　第三部分:與對照組相比FTA單用與內(nèi)皮細(xì)

4、胞共同孵育24h后，細(xì)胞內(nèi)tNOS活性分別增加至161.50±1.69、258.25±3.19和322.27±3.67U/mL(P＜0.05，P＜0.01和P＜0.01)。與對照組相比T、A預(yù)處理的血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)iNOS活性分別降低為4.63±0.46和5.26±0.28 U/mL(P＜0.01和P＜0.05);F預(yù)處理組細(xì)胞內(nèi)iNOS活性無明顯降低為5.99±0.29 U/mL(P＞0.05)。與對照組相比FTA單用預(yù)處理細(xì)胞后培養(yǎng)液

5、中NO含量均明顯增加，分別為686.74±44.73、817.66±85.38和1064.33±115.91μmol/L(P＜0.05, P＜0.01和P＜0.01)。
　　第四部分:吸收成分T、A組細(xì)胞內(nèi)AKT相對蛋白含量與對照組相比增加較明顯(P＜0.01和P＜0.01);F組與對照組相比細(xì)胞內(nèi)AKT相對蛋白含量無明顯增加(P＞0.05)。與對照組相比FTA單用于細(xì)胞后，三者均能明顯促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)AKT蛋白磷酸化變化(P＜0.01

6、，P＜0.01和P＜0.01)。FTA分開作用于細(xì)胞后，三個組中細(xì)胞內(nèi)eNOS相對蛋白含量均高于對照組(P＜0.01，P＜0.01和P＜0.01)，與對照組相比FTA單用三個組中細(xì)胞內(nèi)磷酸化eNOS蛋白含量升高(P＜0.01，P＜0.01和P＜0.01)。
　　結(jié)論:FTA是丹川紅主要吸收藥效成分，丹川紅及其FTA單用對血管環(huán)收縮均有抑制作用，T主要通過內(nèi)皮依耐產(chǎn)生舒血管作用。F、A的舒血管作用是內(nèi)皮依賴性和非內(nèi)皮依賴性聯(lián)合作用的