促結(jié)腸動力藥物的篩選及檳榔堿對結(jié)腸平滑肌細胞效應(yīng)的量效相關(guān)性研究.pdf

1、目的：1.探討中藥生白術(shù)、小茴香、蒲公英、萊菔子、大腹皮、莪術(shù)6味中藥對結(jié)腸縱肌的作用，篩選具有開發(fā)價值的促結(jié)腸動力藥物并初步探索其機制。 2.觀察不同濃度的氫溴酸檳榔堿(Ah)對結(jié)腸平滑肌細胞鈣離子[Ca2+]i移動的影響，以探討其對平滑肌收縮作用的量效相關(guān)性。 方法：1.制備豚鼠結(jié)腸縱肌肌條，運用離體結(jié)腸肌條動力測定方法，以0.9﹪氯化鈉溶液(NS)和乙酰膽堿(ACh)為對照，觀察6味中藥及其他工具藥對肌條的收縮活性

2、。 2.培養(yǎng)大鼠結(jié)腸平滑肌細胞分為3組：正常對照組；Ah刺激組(即時加入由PBS配制的濃度為1×10-13、1×10-12、1×10-11、1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×10-4、1×10-3mol/L的Ah刺激結(jié)腸平滑肌細胞)；阿托品(Atropine)組(以1×10-6mol/LAtropine預處理后，再用1×10-4mol/LAh刺激)。以熒光指示劑Fluo-3

3、/AM負載，通過激光共聚焦顯微鏡(LSCM)動態(tài)觀察不同濃1度Ah對培養(yǎng)結(jié)腸平滑肌細胞鈣移動的作用。 結(jié)果：1.各味中藥對結(jié)腸平滑肌均有不同程度的興奮作用，與NS對照組相比有顯著性差異(P＜0.01)。其中以大腹皮作用最強，峰值為0.97±0.40g，收縮時間最長，為175±238.07s。其他藥物對平滑肌縱肌收縮效應(yīng)的峰值由大到小依次為萊菔子、蒲公英、小茴香、莪術(shù)和生白術(shù)。阿托品、維拉帕米預處理后，加入各中藥后其收縮效應(yīng)減弱，

4、與單獨中藥組相比，兩組間差異有顯著性(P＜0.01)。 2.Ah在1×10-13、1×10-12、1×10-11mol/L濃度的刺激下可使結(jié)腸平滑肌細胞[Ca2+]i熒光強度(FI)分別從5.91±2.91，14.46±4.51，35.50±6.06，變化至6.86±3.53，12.05±3.22，45.54±15.33(P＞0.05)，在1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5、1×

5、10-4mol/L濃度的刺激下可使結(jié)腸平滑肌細胞[Ca2+]iFI分別從22.36±3.91，13.28±4.30，31.78±4.57，19.94±2.70，11.13±2.76，37.67±15.01，9.65±4.02增高至24.75±4.45，15.68±4.88，38.26±5.28，25.56±3.33，14.39±3.49，48.93±19.78，12.56±5.34(P＜0.05)；如應(yīng)用阿托品預處理，則FI從4.28±