甲基蓮心堿對平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)堆積和增殖的影響的實驗研究.pdf

1、本實驗旨在研究體外甲基蓮心堿(neferine，Nef)對氧化低密度脂蛋白導(dǎo)致兔主動脈平滑肌細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)堆積以及平滑肌細(xì)胞增殖的影響，探討其影響的可能機制。 方法:取4-6周齡幼兔主動脈干用PBS漂洗數(shù)次，剝離中膜平滑肌層，經(jīng)原代培樣和傳代培養(yǎng)制備所需平滑肌細(xì)胞，取4-5代細(xì)胞，每測定組分別設(shè)空白組，對照組，以及藥物組，實驗中對照組和試驗組在每一濃度點均設(shè)3瓶細(xì)胞進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，重復(fù)實驗3次。以oxLDL為泡沫細(xì)胞誘導(dǎo)劑，觀察Ne

2、f對兔主動脈平滑肌細(xì)胞內(nèi)TG、TC堆積的影響，分別使用黃嘌呤氧化法測定細(xì)胞內(nèi)超氧化物歧化酶(SOD)的活性，用DTNB直接顯色法測定谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的活性，以探討甲基蓮心堿抗氧化作用的可能機制。觀察Nef對oxLDL導(dǎo)致的兔主動脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響，通過MTT比色法測定細(xì)胞內(nèi)游離[Ca2+]i濃度探討其在體外影響平滑肌細(xì)胞增殖的可能機制。 結(jié)果:1，實驗證明與對照組相比Nef可顯著抑制oxLDL誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)

3、胞內(nèi)TG、TC的堆積，并呈劑量依賴性，隨著Nef濃度的增加而增大。2，oxLDL組平滑肌細(xì)胞內(nèi)SOD和GSH-PX活性較正常組降低，Nef處理組平滑肌細(xì)胞內(nèi)SOD和GSH-PX的活性明顯升高(P＜0.05)。3，平滑肌細(xì)胞內(nèi)加入Nef可顯著抑制oxLDL誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增殖，同時平滑肌細(xì)胞內(nèi)[Ca2+]i顯著降低。 結(jié)論:Nef可顯著抑制oxLDL誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞脂質(zhì)堆積和增殖，其機制可能與Nef增強平滑肌細(xì)胞自身抗氧化能力以及