扶腎降濁法干預(yù)MsPGN大鼠進(jìn)展性腎小球硬化的作用機(jī)制.pdf

1、目的：
　　系膜增生性腎小球腎炎(MsPGN)是我國(guó)原發(fā)性腎小球疾病中最常見(jiàn)的病理類(lèi)型，占我國(guó)腎臟穿刺病人的50％左右[1、2]，也是我國(guó)慢性腎臟病(CKD)進(jìn)展到腎功能衰竭的主要類(lèi)型。部分系膜增生性腎小球腎炎遷延不愈，逐漸進(jìn)展為腎小球硬化，預(yù)后不良。腎小球硬化主要病理變化為彌漫性腎小球系膜細(xì)胞增生及不同程度系膜基質(zhì)增多?，F(xiàn)有研究證實(shí)，細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)過(guò)度積聚、腎小球細(xì)胞增生、腎小球足細(xì)胞逐漸丟失是導(dǎo)致腎小球硬化發(fā)生和發(fā)展的重

2、要機(jī)制。系膜增生性腎小球腎炎進(jìn)展到腎小球硬化是引起腎功能衰竭的重要原因。目前腎小球硬化的機(jī)理尚不十分清楚。在治療上，西藥尚無(wú)可靠療法，許多藥物僅停留在實(shí)驗(yàn)室研究階段。因此尋找高效、無(wú)毒副作用的藥物尤為重要。扶腎降濁方采用臨床治療慢性腎功能衰竭的常用藥，由山茱萸、生黃芪、白花蛇舌草、鬼箭羽、丹參及益母草中藥組成。臨床研究發(fā)現(xiàn)[3]，扶腎降濁法對(duì)慢性腎功能衰竭具有很好的療效，長(zhǎng)期用藥安全可靠、療效顯著。
　　腎小球硬化是一種慢性進(jìn)展性

3、、終身性疾病。根據(jù)其發(fā)病及發(fā)展過(guò)程中的臨床表現(xiàn)和特點(diǎn)，腎小球硬化屬于中醫(yī)學(xué)的“關(guān)格”、“水腫”、“腎勞”、“癃閉”、“溺毒”等范疇。研究表明不少單昧中藥及中藥復(fù)方具有延緩和逆轉(zhuǎn)腎小球硬化作用，這些單味藥及復(fù)方藥多屬補(bǔ)益、活血、祛濕類(lèi)中藥，與多數(shù)中醫(yī)學(xué)者認(rèn)為的腎小球硬化發(fā)病機(jī)制屬于“虛、瘀、濕、毒”[4]相吻合，研究還表明中藥的治療途徑是通過(guò)多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)而起作用的，部分研究甚至深入到基因水平。扶腎降濁方由山茱萸、生黃芪、白花蛇舌草、鬼箭

4、羽、丹參及益母草6味中藥組成，方中山茱萸、生黃芪扶腎健脾以扶正;白花蛇舌草、鬼箭羽利濕解毒以祛濕;丹參、益母草活血化瘀以通脈祛瘀。本方扶腎健脾、利濕化濁、活血祛瘀，諸藥合用，標(biāo)本兼治，扶正祛邪，共同延緩腎小球硬化的發(fā)生和發(fā)展。
　　本研究以MsPGN大鼠為模型，延長(zhǎng)造模時(shí)間使其逐漸發(fā)展至腎小球硬化。在實(shí)驗(yàn)中觀(guān)察扶腎降濁法對(duì)TGF-β1、CTGF及AngⅡ等纖維化因子及腎組織病理學(xué)的影響，以闡述扶腎降濁法對(duì)系膜增生性腎炎模型大鼠進(jìn)展

5、性腎小球硬化的干預(yù)機(jī)制，為臨床應(yīng)用該藥治療腎小球硬化提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：
　　1、建立系膜增生性腎小球腎炎大鼠模型，延長(zhǎng)造模時(shí)間使其逐漸發(fā)展成腎小球硬化。
　　2、將Wister大鼠分為正常組、模型組、中藥組及西藥組。中藥組及西藥組于造模同時(shí)給予干預(yù)，中藥組扶腎降濁方灌胃，劑量為17.01g/kg，西藥組以苯那普利灌胃，劑量為1.8mg/kg。兩組均每日一次，用藥滿(mǎn)16周。
　　3、觀(guān)察扶腎降濁法對(duì)進(jìn)展性腎

6、小球硬化大鼠24h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮的影響，探討扶腎降濁法對(duì)進(jìn)展性腎小球硬化大鼠腎功能的干預(yù)作用。
　　4、用免疫熒光化學(xué)染色的方法檢測(cè)腎組織中TGF-β1及CTGF的表達(dá);光鏡下觀(guān)察腎組織形態(tài)學(xué)變化，探討扶腎降濁法對(duì)纖維化因子及腎小球組織病理學(xué)的影響。
　　5、通過(guò)免疫熒光化學(xué)染色方法檢測(cè)AngⅡ的表達(dá)，探討扶腎降濁法對(duì)腎素-血管緊張素系統(tǒng)的影響。
　　結(jié)果：
　　1、成功建立進(jìn)展性腎小球硬化模型。用藥干

7、預(yù)16周后，模型組24h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮、TGF-β1和CTGF均明顯升高與正常組相比呈顯著性差異(P＜0.05)。光鏡下腎小球系膜增生明顯、腎小球肥大。
　　2、扶腎降濁法可保護(hù)腎功能。中藥組24h尿蛋白、血肌酐、血尿素氮均明顯降低，與模型組相比呈顯著性差異(P＜0.05);與西藥組相比無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3、扶腎降濁法可降低腎組織TGF-β1和CTGF的表達(dá)。模型組TGF-β1、CTGF的表達(dá)程度比正常組明顯

8、升高(P＜0.05);中藥組、西藥組均較模型組明顯減輕(P＜0.05);中藥組與西藥組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TGF-β1和CTGF具有相關(guān)性。
　　4、扶腎降濁法可降低腎組織AngⅡ的表達(dá)。模型組AngⅡ的表達(dá)較正常組明顯升高(P＜0.05);中藥組、西藥組均較模型組明顯減輕(P＜0.05)，中藥組與西藥組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TGF-β1和AngⅡ具有相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:扶腎降濁法可以改善腎功能;抑制TGF-β1