大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身反應(yīng)性腦脊髓炎的影響.pdf

1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身反應(yīng)性腦脊髓炎的影響姓名：王敦敬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：胡學(xué)強(qiáng)20070602中山大學(xué)博士研究生畢業(yè)論文大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用及其對(duì)EAE的影響炎衣原體感染多發(fā)性硬化的影響，以便為如何在多發(fā)性硬化患者中應(yīng)用大環(huán)內(nèi)酯類抗生素提供依據(jù)。本課題研究?jī)?nèi)容包括兩部分：第一部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)脾細(xì)胞凋亡和增殖的作用；第二部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)樹(shù)突狀細(xì)胞

2、分化、成熟的影響；第三部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的免疫調(diào)節(jié)作用對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎的影響。第一部分：大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)脾細(xì)胞凋亡和增殖的作用目的：探討大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)培養(yǎng)脾細(xì)胞凋亡和增殖的作用，以闡明大環(huán)內(nèi)酯類抗生素在免疫調(diào)節(jié)中的作用。方法：從髓鞘堿性蛋白肽段6886(MBP6886)誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)性自身反應(yīng)性腦脊髓炎(EAE)Lewis大鼠中獲得脾細(xì)胞，然后在MBP6886和重組大鼠白細(xì)胞介素2(rRJL2)的共同刺激下進(jìn)行培養(yǎng)。根據(jù)

3、干預(yù)方法的不同，把培養(yǎng)的脾細(xì)胞分為control組、阿齊霉素組(AM)以及克拉霉素組(CM)。在脾細(xì)胞的培養(yǎng)體系中加入不同濃度的阿齊霉素和克拉霉素，首先用AnnexinV測(cè)定凋亡試劑盒對(duì)在低濃度(≤10itg／m1)AM和CM中培養(yǎng)的脾細(xì)胞進(jìn)行染色，然后應(yīng)用流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞凋亡。在此基礎(chǔ)上，觀察10itg／mlAM和CM對(duì)增殖的作用，在10IIg／mlAM和CM中培養(yǎng)脾細(xì)胞24d時(shí)，在培養(yǎng)結(jié)束前6d時(shí)，加入3HTdR，應(yīng)用13閃爍儀測(cè)

4、定3HTdR的摻入率，以了解AM和CM對(duì)脾細(xì)胞增殖的作用。此外，還觀察了高濃度(100itg／m1)AM和CM對(duì)脾細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果：脾細(xì)胞在低濃度(≤10ite／m1)AM和CM中培養(yǎng)24d時(shí)，分別有3040％和2030％的發(fā)生早期凋亡，有2030％細(xì)胞為AnnexinV和PI雙陽(yáng)性，與control組相比沒(méi)有顯著性差異(P005)，但是10updml的AM和CM可抑制脾細(xì)胞的增殖，抑制率達(dá)30％左右。高濃度(100lIg／m1)A