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1、目的:研究白介素2(IL-2)對同種異基因間混合淋巴細胞反應(yīng)的影響,間接反映其對移植物抗宿主病(Graft Versus Host Disease,GVHD)的調(diào)節(jié)作用,論證SOCS-3(suppressors of cytokine signaling 3)基因在此過程中的作用與機制。 方法: 1.用IL-2(50U/mL)預(yù)孵育naive D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞、C57BL/6小鼠脾細胞和nalve C57BL/
2、6小鼠CD4+T細胞,然后用OVA<,323-329>特異性抗原和BALB/c小鼠異基因抗原分別對其進行刺激,測定naiveD011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞、C57BL/6小鼠脾細胞和nalve C57BL/6小鼠CD4+T細胞免疫增殖能力。 2.用IL-2預(yù)孵育nalve D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞、C57BL/6小鼠脾細胞和nalve C57BL/6小鼠CD4+T細胞,檢測SOCS-3基因的表達變化。用OVA<,323-32
3、9>特異性抗原刺激活化D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞,檢測T細胞經(jīng)抗原活化后SOCS-3基因的表達變化。 3.構(gòu)建pLX-SOCS3-SN載體,建立高表達SOCS-3基因的D011.10細胞(DS細胞),用OVA<,323-329>特異性抗原刺激活化DS細胞,檢測DS細胞的免疫增殖能力。 結(jié)果: 1.Nalve D011-10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞、C57BL/6小鼠脾細胞和nalveC57BL/6小鼠CD4+T細胞經(jīng)IL-
4、2預(yù)孵育后對OVA<,323-329>特異性抗原和同種異基因抗原免疫增殖能力明顯減弱。 2.Nalve D011-10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞、C57BL/6小鼠脾細胞和nalveC57BL/6小鼠CD4+T細胞經(jīng)IL-2預(yù)孵育后,SOCS-3的表達明顯升高,在4-6h達到高峰。D011.10轉(zhuǎn)基因小鼠T細胞經(jīng)OVA<,323-329>硼特異性抗原刺激后SOCS-3的表達明顯降低,以2-3d最低。 3.高表達SOCS一3的DS細胞對
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