依普黃酮及雌二醇對骨質疏松大鼠下頜骨成骨細胞生物學活性的影響.pdf

1、很多研究表明，骨質疏松導致的頜骨骨量減少是口腔種植失敗的重要原因之一，因此，有效的防治骨質疏松成為口腔醫(yī)學研究的熱點。全身用藥雖然可以增加頜骨的骨密度，從而提高種植體成功率，但弊端也很大。為此，劉洪臣提出的人工種植牙給藥系統(tǒng)為防治骨質疏松和提高種植體成功率提供了很好的途徑。在治療骨質疏松藥物中，雌二醇及依普黃酮聯(lián)合應用有望成為理想的治療藥物，所以本實驗通過研究骨質疏松患者種植體周圍靶細胞-骨質疏松頜骨成骨細胞生物學活性的變化和雌二醇及依

2、普黃酮對其的影響，為人工種植牙給藥系統(tǒng)提供一定的實驗研究基礎。 第一部分、骨質疏松動物模型的建立和頜骨與全身骨質疏松的關系。 目的：建立絕經(jīng)后骨質疏松動物模型，研究頜骨骨質疏松與全身的關系。 方法：采用摘除大鼠雙側卵巢的方法建立動物骨質疏松模型，通過檢測體重、股骨腰椎骨密度、血清指標的方法確定骨質疏松模型是否建立。通過檢測頜骨骨密度和組織切片判斷頜骨骨質疏松的情況。 結果：在術后4w時，ovx組的大鼠體重

3、比sham組顯著增加，腰椎和股骨出現(xiàn)骨密度下降，血清中鈣出現(xiàn)降低，而堿性磷酸酶和骨鈣素出現(xiàn)了升高。下頜骨在術后4w先出現(xiàn)升高，上頜骨在整個實驗過程中未出現(xiàn)顯著的骨密度變化，但是兩者在術后均呈現(xiàn)了降低的趨勢。HE組織切片顯示下頜骨ovx組骨小梁明顯減少，排列稀疏。 結論：骨質疏松動物模型成功建立，頜骨的變化與全身骨質疏松有關。 第二部分、去勢后下頜骨成骨細胞增殖分化能力的變化。 目的：探討大鼠術后4w和12w下頜骨

4、成骨細胞的培養(yǎng)、鑒定及增殖分化礦化能力的變化。 方法：采用酶消法和組織塊法聯(lián)合培養(yǎng)成骨細胞，用堿性磷酸酶染色、Ⅰ型膠原染色和茜素紅鈣結節(jié)染色鑒定成骨細胞。通過檢測成骨細胞的增殖、堿性磷酸酶、骨鈣素、鈣磷鎂的吸收和鈣結節(jié)比較增殖分化能力的變化。采用RT-PCR和Western Blot的方法檢測PCNA基因蛋白的表達。用透射電鏡觀察成骨細胞微結構的變化。 結果：所培養(yǎng)細胞堿性磷酸酶、Ⅰ型膠原和茜素紅鈣結節(jié)染色均為陽性。術后

5、4w ovx組成骨細胞增殖能力和堿性磷酸酶活性就出現(xiàn)了明顯的升高；術后12w時ovx組成骨細胞增殖能力、堿性磷酸酶活性、骨鈣素、PCNA基因蛋白的表達均比sham組高。透射電鏡的結果顯示12w的ovx組成骨細胞線粒體和異染色質明顯增多，而sham組溶酶體等黑色顆粒和白色小泡較多。 結論：大鼠去勢后下頜骨成骨細胞的增殖分化能力出現(xiàn)了明顯增加。 第三部分、去勢后下頜骨成骨細胞職和UCP2表達的變化 目的：探討術后4w

6、和12w下頜骨成骨細胞ER和UCP2的表達。 方法：采用RT-PCR和Western Blot檢測ER和UCP2的表達變化。 結果：成骨細胞表達了UCP2，且ovx組表達的UCP2比sham組明顯減少。ER在ovx組的基因表達高于sham組。 結論：成骨細胞ER和UCP2表達的改變可能與骨質疏松增殖分化能力變化的機制有關。 第四部分、依普黃酮及雌二醇對骨質疏松成骨細胞生物學活性的影響。 目的：探討

7、雌二醇及依普黃酮聯(lián)合作用對骨質疏松性成骨細胞增殖分化的影響和相關基因蛋白的表達。 方法：檢測不同藥物濃度對于骨質疏松成骨細胞的增殖能力和堿性磷酸酶的影響，確定最大促進作用的藥物濃度，用RT-PCR和Western Blot方法檢測藥物對于UCP2、PCNA和ER表達的影響。 結果：所選濃度的雌二醇和依普黃酮均可以增加骨質疏松性成骨細胞的增殖分化能力，未見抑制現(xiàn)象。并且兩種藥物均促進UCP2和PCNA的表達，但聯(lián)合用藥時表