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1、目的:建立重癥急性胰腺炎(SAP)動(dòng)物模型,通過觀察SAP大鼠血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)在急性胰腺炎相關(guān)肺損傷(APALI)中的變化及意義,研究SAP大鼠血清及肺組織TNF-α的水平與肺組織損害之間的關(guān)系,為臨床急性胰腺炎合并肺損傷提供理論支持。
方法:選擇30只SPF雄鼠,隨機(jī)分成五個(gè)組。SAP模型構(gòu)造采用在胰腺被膜下注射的5%牛黃膽酸鈉的方法。對(duì)于假手術(shù)組,僅開腹對(duì)胰腺進(jìn)行翻動(dòng)10次??瞻捉M不做處理。空白組和假手
2、術(shù)組大鼠在造模后6小時(shí)進(jìn)行解剖取標(biāo)本。造模組大鼠分別在造模后第6小時(shí)、12小時(shí)、24小時(shí)三個(gè)時(shí)間點(diǎn)解剖并取標(biāo)本后處死。對(duì)于取得的標(biāo)本,血清淀粉酶使用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定,采用ELISA固(相夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))方法測(cè)定大鼠血清中TNF-α的水平變化,同時(shí)取部分胰腺組織及肺組織HE染色觀察病理變化,應(yīng)用血?dú)夥治鰞x測(cè)定動(dòng)脈血PO2和PCO2,應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)肺組織中TNF-α的表達(dá)。
結(jié)果:在本課題中重癥急性胰腺炎模型構(gòu)造成
3、功。在試驗(yàn)過程中檢測(cè)到:
?、僭炷=M大鼠血清中胰酶的含量升高,進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后提示,差異有顯著性(P<0.05);
?、趯?duì)胰腺組織HE染色后,進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)胰腺造模后出現(xiàn)病理損傷,并且病理損傷的嚴(yán)重程度隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)而加重,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后提示差異有顯著性(P<0.05);
③對(duì)肺組織HE染色后,進(jìn)行觀察發(fā)現(xiàn)肺組織造模后出現(xiàn)病理損傷,并且病理損傷的嚴(yán)重程度隨造模時(shí)間的延長(zhǎng)而加重,統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后提示差異有顯著性(P<0
4、.05);
?、苁褂媒y(tǒng)計(jì)軟件對(duì)肺組織病理評(píng)分、胰腺病理評(píng)分、血清TNF-α等指標(biāo)的變化情況分別進(jìn)行相關(guān)性分析,可以得出該三項(xiàng)指標(biāo)兩兩進(jìn)行相關(guān)分析均呈正相關(guān)。說明隨著時(shí)間延長(zhǎng),血清TNF-α的水平上升,胰腺組織的病理損傷程度加重,肺組織的病理損傷程度加重,并且胰腺與肺組織的病理損傷變化呈正相關(guān)。符合的急性重癥胰腺炎將導(dǎo)致肺損傷的理論。
結(jié)論:
?、俦菊n題采用胰腺被膜下注射法進(jìn)行造模,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)過程中驗(yàn)證,大鼠SAP
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