簇毛麥基因組新的特異重復(fù)序列的分離、鑒定和應(yīng)用.pdf

1、簇毛麥屬(Dasypyrum,又稱 Haynaldia)在植物分類上屬禾本科(Gramineae)小麥族(Triticeae)的小麥亞族(Triticinae),是小麥的近緣屬之一。具有抗白粉病,抗葉銹病和稈銹,抗全蝕病,分蘗力強,小穗數(shù)多,耐旱耐寒,耐鹽和蛋白質(zhì)含量高等許多栽培小麥所需要的有利性狀,是小麥性狀、品質(zhì)改良的重要遺傳資源。簇毛麥屬包括2個物種：二倍體簇毛麥D. villosum(L.) Candargy和四倍體多年生簇毛麥

2、 D. breviaristatum(Lindb. F.) Frederiksen。目前，對二倍體簇毛麥的研究和利用相對較多，已經(jīng)創(chuàng)制了幾套硬粒小麥或普通小麥-二倍體簇毛麥異附加系與代換系，進而把來自染色體6V上的抗白粉病基因Pm21和染色體4V上的抗眼斑病基因PchDv以及和抗小麥梭條花葉病基因Wss1導(dǎo)入到小麥中。最近我們在利用四川農(nóng)業(yè)大學(xué)蔣華仁等率先在國內(nèi)外合成的多年生簇毛麥-小麥的雙二倍體的基礎(chǔ)上，開展了將多年生簇毛麥這一珍貴物

3、種的優(yōu)異基因?qū)胄←湹难芯抗ぷ?，鑒定出一批導(dǎo)入多年生簇毛麥有利性狀的優(yōu)異資源并選育了一批具有多年生簇毛麥染色質(zhì)的中間材料，建立了多個能夠檢測簇毛麥染色質(zhì)的RAPD、SSR和SCAR分子標記，豐富了簇毛麥基因資源在小麥中的應(yīng)用的實踐。
　　隨著遠緣雜交將小麥族植物優(yōu)異基因?qū)胄←湹娜旧w工程育種的進行，有效地檢測與跟蹤外源染色質(zhì)顯得十分重要。建立在DNA序列基礎(chǔ)上的分子標記RAPD和SCAR技術(shù)以其準確、快捷、不受植物生長時期的限制

4、、成本低等優(yōu)點被廣泛的運用，特別在建立染色體特異性標記、基因組特異性標記和物種特異性標記上具有其他分子標記不可比擬的優(yōu)點。本論文的研究結(jié)果如下：
　　1、利用RAPD技術(shù)篩選出的高度重復(fù)序列（OPM2937）設(shè)計特異PCR引物對含簇毛麥染色質(zhì)的材料以及對照組多個小麥進行分析鑒定。結(jié)果顯示，所有含簇毛麥染色質(zhì)的材料均能擴增出目標片段，而對照組小麥均未擴增出目標片段。對一套中國春-簇毛麥附加系(Chinese Spring-D. vi

5、llosum additions，CSDA1V-CSDA7V）的擴增結(jié)果表明 CSDA1V-CSDA7V均能擴增出目標片段，表明OPM2937存在于簇毛麥全套染色體上。簇毛麥后代Y93-1-31等都能夠擴增出約目標條帶，表明該特異引物不僅可以用于鑒定簇毛麥，而且可以鑒定簇毛麥的后代。該標記可以作為多年生簇毛麥基因組的特異分子標記檢測導(dǎo)入到小麥背景中的多年生簇毛麥染色質(zhì)。
　　2、以中國春基因組總DNA為封阻，以O(shè)PM2937為探針