L-選擇素及其配體在HepG2細胞中的表達及其介導腫瘤轉移作用的研究.pdf

1、目的：
　　1.檢測L-選擇素、配體SLeX及配體合成酶FUT7在正常肝細胞株L-02及肝癌細胞株HepG2中的表達，分析表達變化與肝癌細胞轉移的相關性。
　　2.探討低分子肝素對L-選擇素、SLeX、FUT7表達的影響及其對HepG2細胞株增殖、黏附和遷移的影響。
　　3.研究分別抑制L-選擇素與配體SLeX的表達后HepG2細胞遷移率及黏附率的變化。
　　方法：
　　1.RT-PCR、Western-b

2、lot、流式細胞技術和免疫細胞爬片化學染色方法分別檢測L-選擇素、SLeX、FUT7在L-02正常肝細胞株和HepG2肝癌細胞株中的表達。
　　2.FN蛋白黏附實驗、Transwell實驗觀察HepG2細胞株的異質黏附性和遷移能力。
　　3.不同濃度低分子肝素作用于 HepG2細胞株，四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測其細胞生長抑制率，RT-PCR法、流式細胞技術分別檢測 L-選擇素、SLeX、FUT7表達量的變化。
　　

3、4.分別用低分子肝素抑制L-選擇素，用抗SLeX抗體封閉HepG2細胞表面SLeX抗原后,接種于24孔Transwell小室檢測HepG2細胞遷移率的變化，FN蛋白粘附實驗觀察HepG2細胞株的異質黏附性的變化。
　　結果：
　　1.從RNA水平，L-選擇素、SLeX、FUT7在正常肝細胞株L-02中均不表達，而在肝癌HepG2細胞株中都有表達；從蛋白水平，L-選擇素在HepG2細胞表達率為（10.09±0.5）％，West

4、ern-blot及免疫化學染色均顯示 SLeX在 HepG2細胞高表達而在L-02細胞則無表達。
　　2.低分子肝素對HepG2細胞株表達的L-選擇素及FUT7有抑制作用，而對SLeX的表達沒有影響，四甲基偶氮唑藍(MTT)法測低分子肝素對 HepG2細胞的生長有抑制作用。
　　3.分別減少L-選擇素及SLeX的表達量可以使HepG2細胞穿膜數減少（P<0.01）；FN黏附細胞數減少（P<0.01）。
　　結論：