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文檔簡介
1、本文應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測胃癌組織、癌前病變組織中EphB2的表達情況并與正常胃黏膜組織對照,采用CD34標(biāo)記血管內(nèi)皮細胞,計算微血管密度(MicrovesseldensityMVD)。分析EphB2表達與微血管密度(MVD)和胃癌,癌前病變主要臨床病理特征的相關(guān)性。為EphB2作為反映胃癌組織及癌前病變組織生物學(xué)指標(biāo)提供理論依據(jù),進一步探討胃癌與癌前病變的關(guān)系,為胃癌及癌前病變的早期診斷,早期治療提供理論依據(jù)。 材料與方法:
2、一、材料與方法收集遼寧省人民醫(yī)院2005年1月至2006年3月經(jīng)手術(shù)切除并經(jīng)病理證實為胃癌組織標(biāo)本75例,根據(jù)TNM分期(方法采用1997年國際抗癌聯(lián)盟UICC公布方案)。0期5例,Ⅰ期9例,Ⅱ期23例,Ⅲ期25例,Ⅳ期13例。癌前病變標(biāo)本45例,正常胃黏膜組織標(biāo)本30例。所有標(biāo)本均經(jīng)100ml/L中性福爾馬林固定,石蠟包埋,制成5μm厚的連續(xù)切片,每例切片均作HE(Hematoxylinandeosin)染色和鏈霉素親生物素-過氧化酶
3、(S-P)免疫組化技術(shù)染色,EphB2(H-80)SC-28980兔抗人多克隆抗體購于美國SantaCruz公司。工作濃度為1:250。鼠抗人CD34單克隆抗體,購于北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司。以PBS代替一抗做陰性對照,最后做DBA顯色。蘇木素復(fù)染,常規(guī)脫水,透明封片。染色陽性標(biāo)記均為棕褐色。EphB2的表達位于陽性細胞胞漿內(nèi),呈彌漫或顆粒樣分布。CD34的表達位于血管內(nèi)皮細胞內(nèi),呈彌漫或顆粒樣分布,以微血管密度表示(Microve
4、sseldensityMVD)。 二、觀察指標(biāo)(一)EphB2與CD34的表達:1.EphB2在胃癌、癌前病變及正常胃黏膜組織的表達。 2.EphB2在胃癌不同臨床病理分期中的表達。 3.CD34(以MVD表示)在胃癌、癌前病變及正常胃黏膜組織的表達。 4.EphB2與CD34(以MVD表示)在胃癌組織表達情況的相關(guān)性。 (二)統(tǒng)計學(xué)分析:應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理實驗數(shù)據(jù),記數(shù)資料采用秩
5、和檢驗(Kruskal-Wallis),X2一致性檢驗統(tǒng)計方法,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義;計量資料采用單因素方差分析,隨后采用q檢驗進行兩兩比較,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義;CD34(以MVD表示)與EphB2兩組數(shù)據(jù)相關(guān)分析采用spearman等級相關(guān)分析,P<0.05為差異,有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果:一、EphB2在胃癌組織表達為64.00﹪(48/75例),而在癌前病變?yōu)?3.33﹪(15/45例),在正常胃黏膜為1
6、0.00﹪(3/30例)。經(jīng)秩和檢驗H=29.113,P=0.000,三者存在顯著差異。 二、EphB2在胃癌組織不同臨床病理分期表達不同,其在0期,Ⅰ期,Ⅱ期,Ⅲ期及Ⅳ期的表達率分別為0.00﹪(0/5例),33.33﹪(3/9例),52.17﹪(12/23例),80.00﹪(20/25例),100.0﹪(13/13例),隨臨床病理分期增加表達率呈上升趨勢,經(jīng)X2一致性檢驗H=23.518,P=0.000,各分期之間存在顯著差
7、異。 三、CD34(以MVD表示)在胃癌、癌前病變及正常胃黏膜表達呈下降趨勢,分別為67.61±13.13,33.92±3.60,21.29±3.28。經(jīng)方差分析F=318.831,P=0.000,存在顯著差異。且經(jīng)q檢驗P=0.000,各組間存在顯著差異。 四、EphB2、CD34(以MVD表示)在胃癌組織中皆呈高表達,經(jīng)spearman統(tǒng)計學(xué)處理rs=0.915,P=0.000,兩者具有正相關(guān)。 結(jié)論:一、本
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