CD16+單核細(xì)胞亞群與子癇前期病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究.pdf

1、子癇前期（Pre-eclampsia，PE）是威脅母嬰生命的產(chǎn)科四大死亡疾病之一。目前，臨床上用于監(jiān)測(cè)PE病情嚴(yán)重程度的相關(guān)指標(biāo)主要有肝腎功能測(cè)定、尿液檢查及眼底檢查。然而，這些指標(biāo)中沒(méi)有一個(gè)被證實(shí)有足夠的敏感性或特異性來(lái)預(yù)測(cè)該疾病病情的進(jìn)展。因此，仍期待更敏感、更特異的指標(biāo)。
　　單核細(xì)胞是一類異質(zhì)型的細(xì)胞群，已有研究證實(shí)循環(huán)中存在著執(zhí)行不同功能的單核細(xì)胞亞群。目前，對(duì)人循環(huán)中單核細(xì)胞亞群的劃分主要基于CD14和CD16流式細(xì)胞

2、術(shù)分析。2010年國(guó)際免疫學(xué)會(huì)命名委員會(huì)將人類外周血中單核細(xì)胞分為三種類型：經(jīng)典型（CD14++CD16-）、中間型（CD14++CD16+）和非經(jīng)典型（CD14+CD16++）。中間型和非經(jīng)典型單核細(xì)胞具有較高的活化炎癥反應(yīng)的潛能，又被統(tǒng)稱為“促炎型”CD16+單核細(xì)胞；它們?cè)诙喾N炎癥相關(guān)的疾病如冠心病、哮喘及I型糖尿病中數(shù)量明顯增加，且與這些疾病的病情進(jìn)展和不良預(yù)后呈正相關(guān)。
　　PE被認(rèn)為是一種過(guò)度的炎癥反應(yīng)性疾病，目前尚無(wú)

3、文獻(xiàn)報(bào)道 CD16+單核細(xì)胞亞群在PE進(jìn)程中的動(dòng)態(tài)變化及與該疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)性。因此，本研究以CD16+單核細(xì)胞亞群為研究靶標(biāo)，以正常晚孕對(duì)象為對(duì)照，將 PE患者分為輕度 PE組和重度PE組。采用最新的人單核細(xì)胞亞群劃分方法（基于CD14/CD16/HLA-DR流式細(xì)胞術(shù)），檢測(cè)PE對(duì)象外周血中CD16+單核細(xì)胞亞群數(shù)量（包括其絕對(duì)數(shù)和百分比），了解該型細(xì)胞數(shù)量的變化是否與疾病嚴(yán)重程度有關(guān)；并進(jìn)一步探索該細(xì)胞亞群在診斷和預(yù)測(cè)PE病情進(jìn)

4、展中的應(yīng)用價(jià)值。這將有助于指導(dǎo)PE的治療策略及終止妊娠時(shí)機(jī)，對(duì)降低圍產(chǎn)期母胎死亡率和改善圍生兒預(yù)后有重要意義。
　　第一部分、子癇前期患者循環(huán)中CD16+單核細(xì)胞亞群數(shù)量變化研究
　　目的：研究循環(huán)中CD16+單核細(xì)胞亞群（包括CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞和CD14+CD16++HLA-DR+非經(jīng)典型單核細(xì)胞）百分比和絕對(duì)數(shù)在PE進(jìn)展中的變化。
　　方法：以正常晚孕婦女為對(duì)照組，以PE患者為試驗(yàn)組

5、，按病情輕重程度將其分為輕度PE組和重度PE組。分別采集正常晚孕婦女（n=30），輕度PE患者（n=15）和重度 PE患者（n=30）外周血（肝素抗凝），經(jīng)紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞，采用三色熒光標(biāo)記直接染色（APC-CD14、PE-CD16和FITC-HLA-DR單克隆抗體）和熒光計(jì)數(shù)微球流式細(xì)胞分析（FCM）技術(shù)，檢測(cè)各組外周血中CD16+單核細(xì)胞亞群的百分比和絕對(duì)數(shù)。
　　結(jié)果：重度PE組患者外周血中CD14++CD16+HLA

6、-DR+中間型單核細(xì)胞百分比高于輕度 PE組和對(duì)照組（P＜0.01）；而輕度 PE組、重度 PE組和對(duì)照組三組間CD14+CD16++HLA-DR+非經(jīng)典型單核細(xì)胞百分比沒(méi)有明顯差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，重度PE組和輕度PE組患者外周血中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)明顯增加（P＜0.01）；且與輕度 PE組相比，重度 PE組患者CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)亦增加（P＜0.

7、05）；與對(duì)照組相比，重度 PE組婦女 CD14+CD16++HLA-DR+非經(jīng)典型單核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)也明顯升高（P＜0.01）。
　　結(jié)論：循環(huán)中CD16+單核細(xì)胞亞群數(shù)量隨著PE病情的進(jìn)展明顯增加，提示其在反映病情嚴(yán)重程度和疾病進(jìn)展方面有一定的相關(guān)性。
　　第二部分、子癇前期患者CD16+單核細(xì)胞亞群數(shù)量與病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性研究
　　目的：研究循環(huán)中CD16+單核細(xì)胞亞群百分比和絕對(duì)數(shù)與PE病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性。

8、r>　　方法：根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用Spearman相關(guān)性分析法對(duì)PE患者外周血中CD16+單核細(xì)胞亞群百分比和絕對(duì)數(shù)與病情嚴(yán)重程度進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果：外周血中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞百分比（r=0.447，P＜0.01）和絕對(duì)數(shù)（r=0.332，P＜0.05）均與PE病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。而外周血中CD14+CD16++HLA-DR+非經(jīng)典型單核細(xì)胞百分比（r=-0.145，P＞0.05）

9、和絕對(duì)數(shù)（r=-0.174，P＞0.05）與PE病情的嚴(yán)重程度無(wú)相關(guān)性。
　　結(jié)論：循環(huán)中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞百分比和絕對(duì)數(shù)均與PE病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，其可作為臨床監(jiān)測(cè)PE病情進(jìn)展的參考指標(biāo)。
　　第三部分、CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞數(shù)量在子癇前期臨床診斷和預(yù)測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值研究
　　目的：研究循環(huán)中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞數(shù)量在PE中的診

10、斷和預(yù)測(cè)的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：根據(jù)第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果和第二部分研究結(jié)論，采用受試者工作特征曲線（ROC）分析和Logistic單元及多元回歸分析來(lái)建立以循環(huán)中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞數(shù)量作為診斷和預(yù)測(cè)PE的指標(biāo)體系。
　　結(jié)果：通過(guò)ROC分析發(fā)現(xiàn)，外周血中CD14++CD16+HLA-DR+中間型單核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)診斷PE的曲線下面積為0.8226，最佳的診斷閾值為56個(gè)/μl，其診斷PE的敏感度和特異