WB-DWIBS成像檢測胃癌及轉移淋巴結與組織病理學的關系研究.pdf

1、在我國，胃癌是最常見的惡性腫瘤之一，是我國第二大常見腫瘤。惡性腫瘤一旦確定，疾病程度的判斷(分期)就非常重要，腫瘤分期有助于準確治療方案的確定以及判斷預后等。在腫瘤術前的分期中，影像醫(yī)學起著至關重要的作用，同時也在監(jiān)控療效、檢測腫瘤復發(fā)和轉移的過程中發(fā)揮著重要的作用。在胃癌檢測的影像學方法中，氣鋇雙重造影的敏感性和特異性不高。CT對胃癌分期的準確性可達65％～69％，常規(guī)MRI技術在胃癌分期中的應用并不受重視，CT和MR兩種技術的T、N

2、分期并未顯現出統(tǒng)計學差異。其中主要的原因在于兩種技術均受限于不能檢測正常大小的轉移淋巴結。由此可見，轉移小淋巴結的確定已成為制約利用影像學技術對胃癌正確分期的主要因素。近年來，磁共振擴散加權成像(DWI)已成為腫瘤檢測中的重要技術之一。DWI屬于功能性磁共振成像的一種，可以對病變內部水分子彌散狀況進行定性和定量分析，借以反映病變的組織結構特點和細胞膜的完整性等微觀變化。在此基礎上，2004年出現的背景抑制全身擴散加權成像技術(WB-DW

3、IBS)則是DWI技術的又一次突破，打破了DWI在體部應用的一些局限性，可以在相對較短的時間內行全身大范圍的擴散成像。特別在惡性腫瘤轉移灶的檢測方面顯示出獨一無二的優(yōu)勢，彌補了影像學技術在淋巴結及轉移灶定性定位方面的缺陷，因此在胃癌的檢測及分期方面具有潛在的臨床價值。惡性腫瘤的轉移機制至今尚不完全清除，它受到多種因素的調控，包括病程長短、發(fā)病部位、腫瘤細胞的惡性程度以及相關基因及蛋白的表達等，如：PCNA、MMP-2、ICAM-1及VE

4、GF-C等，以上因素必然會對轉移淋巴結的細胞構成、細胞密度產生一定的影響，進而影響淋巴結內水分子的彌散情況。而WB-DWIBS是反應細胞水平水分子彌散的無創(chuàng)檢測工具，因此基于此，利用DWI及WB-DWIBS不僅能對惡性腫瘤進行分期，還可對其生物學行為進行評估，為臨床的診斷和治療提供更加詳盡的信息，促進治療水平的提高。
　　 目的：⑴根據胃癌的手術、病理結果、免疫組化結果，探討PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C在胃癌

5、中的表達情況，以及以上蛋白的表達對其生物學行為及淋巴結轉移的影響。⑵根據胃癌及轉移淋巴結的DWI及WB-DWIBS的掃描結果，探討胃癌及轉移淋巴結的影像學表現特點。⑶探討DWI及WB-DWIBS評估胃癌的生物學特征的價值。
　　 方法：①選擇2009年5月～2010年10月之間在我院行胃癌切除的患者18例，其中男性13例，女性5例，年齡在40～85歲之間，平均為59.2±11.8歲。所有病例手術前均未行任何的抗腫瘤治療，臨床資料

6、完整。②所有患者的WB-DWIBS掃描利用1.5T的磁共振儀(Philips，Achieva Nova1.5T Dual，Netherland)進行掃描。在檢查床上放置掃描加長板，使研究對象以仰臥、足先進位平臥于加長板上。激光定位線定位于下頜部位。線圈采用磁體內置的BODY線圈，掃描采用多個層塊的自旋回波(spin echo，SE)方式，采用平面回波(echo planar imaging，EPI)技術，圖像采集為橫軸位。信號采集為體線

7、圈，自由平靜呼吸狀態(tài)下進行掃描。WB-DWIBS掃描參數為：TR/TE=shortest/shortest，矩陣=256×256，體素=4mm×4mm，層厚=5mm，層間距=1mm，掃描視野(field of view，FOV)：400mm(左右)×330mm(前后)。信號平均數(number of signal averaged，NSA)=2，6值選擇OS/mm2和600s/mm2。掃描范圍從頭至雙膝關節(jié)以下，共7個層塊420層。掃描

8、時間共約16分鐘。③在圖像工作站(Philips extended MR workspace，Philips Medical Systems，Netherland，release2.1，2007-09-07)上使用最大信號強度投影(maximum intensityprojection，MIP)的方法進行圖像重組。將每一層塊所得的圖像沿身體長軸進行多角度旋轉重組，之后將各個層塊的重組圖像使用工作站的拼接(Mobiview)功能功能拼接成

9、全身擴散加權像。將原始橫軸位圖像和重組的全身圖像經過黑白灰度反轉后得到類似SPECT或PET/CT的圖像。將原始圖像使用(Diffusion)功能重建出ADC圖和EADC圖。結合T1WI、T2WI等圖像，并通過勾畫和復制感興趣區(qū)(region of interest，ROI)的方式測量胃癌、轉移淋巴結的信號強度、信噪比、ADC值和EADC值，較大的病變采用3～5個ROI進行測量并取平均值，測量中心避開中心壞死區(qū)。④WB-DWIBS掃描所

10、得圖像均在圖像工作站上進行評價，將橫軸位圖像逐層進行閱片評價并記錄檢出的轉移淋巴結的數目。將轉移淋巴結定義為發(fā)生于胃癌之外周圍腹腔內的局限性、結節(jié)狀高信號病灶。將DWI圖像、ADC圖和EADC圖進行關聯，通過勾畫并復制粘貼ROI的方法分別測量病灶的ADC值、EADC值和SI值。⑤胃癌病灶切下后，在病灶最大徑處縱行將病灶剖開，觀察并記錄病灶的大體病理表現后常規(guī)固定。大體標本觀察病變的大體類型、測量病灶的最大徑和最小徑。術中切除可疑淋巴結并

11、記錄淋巴結的位置。常規(guī)石蠟包埋后行4μm連續(xù)切片，從中隨機各取出l張進行HE染色，其余的行免疫組織化學染色。HE染色后觀察胃癌的病理類型、惡性程度以及腫瘤細胞對胃壁的浸潤程度。根據腫瘤細胞分化程度的不同分為高、中、低分化3級。浸潤程度分級則將腫瘤細胞分別侵及肌層/肌層以內、突破肌層但達漿膜/漿膜以內、達漿膜外時分別稱為l、2、3級。凡淋巴結中檢測到癌細胞者為陽性淋巴結，否則為陰性。PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C單克隆抗

12、體、免疫組化檢測試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術有限公司產品。對照設置，以PBS代替一抗作陰性對照，免疫組化染色步驟參照第一部分。結果判定由兩位有經驗的病理學醫(yī)生進行共同判斷，PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C陽性染色是在細胞胞漿或胞膜出現棕黃色顆粒，在200倍視野下隨機選取10個視野計算陽性細胞率。⑥測量所得的所有數據采用統(tǒng)計學軟件包SPSS17.0進行統(tǒng)計學計算。計量資料之間的比較采用t檢驗或方差分析，顯著性水準采用0

13、.05(雙側)，相關性研究采用Pearson相關分析；比率之間的比較采用卡方檢驗。
　　 結果：⑴病理結果顯示本組胃癌均為腺癌，淋巴結轉移陽性率為13.45％。⑵PCNA、MMP-2、ICAM-1及VEGF-C陽性細胞表達率分別為78.33％、4.72％、16.35％及76.11％。PCNA與MMP-2、ICAM-1與VEGF-C均為正相關關系(P<0.05)。⑶潰瘍型、浸潤型、隆起型3型病例VEGF-C的表達率分別為79.03

14、％、80.12％、60.02％，具有統(tǒng)計學差異(F=4.312，P=0.048)；VEGF-C的陽性表達率與胃癌的最大徑線呈正相關關系(r=0.752，P=0.046)。⑷MMP-2與轉移淋巴結陽性率、與陽性淋巴結數、與小彎側的陽性淋巴結率均呈正相關關系(P<0.05)。⑸胃癌中PCNA與MMP-2、ICAM-1與VEGF-C相互協(xié)調，參與其淋巴結的轉移。⑹WB-DWIBS圖像上胃癌顯示為程度不同的高信號，少量病灶為略高信號，易為其他組

15、織器官的高信號所掩蓋而不易顯示。⑺DWIBS圖像顯示的轉移淋巴結陽性率為62.16％(23/37)。⑻胃癌的ADC值隨浸潤分級的逐漸增加而下降，EADC值則正好相反(P<0.05)。⑼轉移淋巴結陽性率與轉移淋巴結的ADC值呈正相關(P<0.05)。⑽MMP-2陽性表達率與轉移淋巴結的EADC呈負相關，PCNA與轉移淋巴結的ADC呈正相關關系(P<0.05)。
　　 結論：①WB-DWIBS可用于檢測胃癌及淋巴結轉移，但部分病灶顯