家兔Ⅱ型減壓病病理形態(tài)學(xué)觀察與發(fā)病機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：在建立Ⅱ型減壓病家兔模型基礎(chǔ)上，借助光鏡、電鏡、免疫組化以及全基因表達(dá)譜芯片等手段，研究Ⅲ型減壓病的病理形態(tài)學(xué)改變、相應(yīng)基因及蛋白表達(dá)的變化，初步探討Ⅱ型減壓病的發(fā)病機(jī)制以及高壓氧的治療作用。
　　 方法：⑴保持持續(xù)時間和減壓速度不變，從不同的最高氣壓下減壓，觀察家兔的癥狀與體征，建立家兔Ⅱ型減壓病模型。⑵隨機(jī)分為減壓病組、安全減壓組、HBO治療組和正常對照組，觀察每組動物出艙后表現(xiàn)，處死后解剖觀察全身各個臟器及組織大體改

2、變，分別留取各個器官及組織標(biāo)本，進(jìn)行光鏡觀察；對減壓病家兔脊髓組織進(jìn)行光鏡、電鏡及免疫組化檢測。⑶對減壓病組與安全減壓組家兔脊髓組織進(jìn)行全基因組芯片檢測。
　　 結(jié)果：①本實(shí)驗(yàn)在5 min空氣加壓至800KPa(絕對壓)，停留60min，3～5min快速減至常壓條件下成功建立Ⅱ型減壓病家兔模型。②各組出艙后表現(xiàn)：減壓病組：出艙后出現(xiàn)典型脊髓型減壓病表現(xiàn)，如后肢活動障礙、呼吸困難等；正常對照組、安全減壓組及HBO治療組：未見明顯減

3、壓病癥狀。光鏡下表現(xiàn)：減壓病組：肺組織內(nèi)可見局灶肺不張和急性出血灶，部分血管呈擴(kuò)張狀態(tài)；腦內(nèi)神經(jīng)元變化不明顯，膠質(zhì)細(xì)胞略有增生，腦膜下可見擴(kuò)張的空血管；肝組織灶區(qū)出血，肝竇淤血顯著，匯管區(qū)少量炎細(xì)胞浸潤，肝細(xì)胞水腫，局部可見壞死；其余組織器官均有不同程度病理改變；HBO治療組：形態(tài)學(xué)改變有所改善；安全減壓組與正常對照組：未見明顯病理改變。減壓病組脊髓病理學(xué)改變：通過光鏡觀察到，減壓病組動物脊馥白質(zhì)內(nèi)可見大量空泡形成，軸突水腫、排列紊亂；

4、GFAP的免疫組化染色結(jié)果顯示，從正常對照組→安全減壓組、高壓氧治療組→減壓病組，GFAP陽性細(xì)胞呈增多趨勢(P<0.05)，提示由于軸索的損傷誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞的增生，可作為脊髓損傷的診斷指標(biāo)。電鏡觀察結(jié)果：減壓病組家兔脊髓白質(zhì)結(jié)構(gòu)破壞，可見脫髓鞘改變；正常減壓組、HBO治療組、正常對照組：脊髓組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)均未見明顯病理改變。③基因芯片結(jié)果顯示：減壓病組與安全減壓組間許多基因表達(dá)發(fā)生變化，TNF-α、IL-12A、CAP18、電壓門控通

5、道、CDK抑制劑、酰基輔酶A合成酶短鏈家族成員-2、皮質(zhì)穩(wěn)定素-6、甲狀旁腺激素等，涉及炎癥、激素、細(xì)胞周期及轉(zhuǎn)錄因子等多個方面。
　　 結(jié)論：⑴本實(shí)驗(yàn)成功建立Ⅱ型減壓病兔模型。⑵光鏡檢測結(jié)果提示Ⅱ型減壓病可累及全身各個臟器，減壓病組家兔全身各臟器均發(fā)生嚴(yán)重病理改變，其中肺與脊髓損傷最為嚴(yán)重。⑶實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示脊髓血管內(nèi)氣泡及“原位氣泡”同為Ⅱ型減壓病組家兔脊髓損傷的直接原因，脊髓白質(zhì)出血水腫，神經(jīng)纖維脫髓鞘，膠質(zhì)細(xì)胞增生等為Ⅱ型減