晚期糖基化終末產(chǎn)物激活局部腎素血管緊張素系統(tǒng)導(dǎo)致糖尿病大鼠冠狀動(dòng)脈結(jié)構(gòu)和功能改變.pdf

1、目的:糖尿病的患病率及死亡率逐年提高,其心血管系統(tǒng)并發(fā)癥嚴(yán)重地威脅著人類健康,逐漸成為心血管領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)之一。晚期糖基化終末產(chǎn)物的濃度與糖尿病血管病變的程度相關(guān),局部腎素血管緊張素系統(tǒng)在糖尿病血管病變進(jìn)程中起到重要的作用,已有研究證實(shí)二者之間存在著緊密的聯(lián)系。但是在糖尿病并發(fā)冠狀動(dòng)脈病變中,晚期糖基化終末產(chǎn)物及其受體的水平、局部腎素血管緊張素系統(tǒng)的狀態(tài)、以及二者同冠狀動(dòng)脈血管結(jié)構(gòu)和功能改變的關(guān)系,尚缺乏深入系統(tǒng)的研究。本研究將通過驗(yàn)證

2、“晚期糖基化終末產(chǎn)物激活局部腎素血管緊張素系統(tǒng)導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈結(jié)構(gòu)和功能改變,給予氨基胍或纈沙坦阻斷此通路可以對(duì)冠狀動(dòng)脈起到保護(hù)作用”的工作假說,為防治糖尿病并發(fā)冠心病提供新的理論基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用前景。
　　方法:建立STZ誘導(dǎo)的DM大鼠模型,并給予氨基胍及纈沙坦作為干預(yù)因素,利用免疫組化及ELISA方法對(duì)冠狀動(dòng)脈AGEs進(jìn)行定位、定量檢測,利用PCR及Western blot方法檢測冠狀動(dòng)脈中RAGE的基因及蛋白表達(dá)水平,利用ELIS

3、A、PCR及Western blot方法檢測冠狀動(dòng)脈中ANGⅡ-AT1的表達(dá)水平,利用離體動(dòng)脈環(huán)技術(shù)和電子顯微鏡技術(shù)觀察冠狀動(dòng)脈血管舒縮功能及超微形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變,利用Western blot技術(shù)測定冠狀動(dòng)脈組織中eNOS、ET-1及NF-κB的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1、DM大鼠冠狀動(dòng)脈AGEs含量增多,多存在于冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織,冠狀動(dòng)脈組織中的RAGE的mRNA及蛋白表達(dá)水平上調(diào),冠狀動(dòng)脈血管環(huán)的收縮及舒張反應(yīng)性降低,對(duì)KCl的敏

4、感性增加,對(duì)ACh的敏感性降低,冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織的超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)病理性改變,冠狀動(dòng)脈中活性NF-κB、ET-1蛋白表達(dá)增加,eNOS蛋白表達(dá)減少;2、給予氨基胍干預(yù)DM大鼠,可以減少冠狀動(dòng)脈中AGEs的生成,降低RAGE的mRNA及蛋白表達(dá)水平,提高冠狀動(dòng)脈血管環(huán)的收縮及舒張反應(yīng)性,降低對(duì)KCl的敏感性,提高對(duì)ACh的敏感性,改善冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織的超微結(jié)構(gòu),減少冠狀動(dòng)脈中活性NF-κB、ET-1蛋白的表達(dá),增加eNOS蛋白的表達(dá);3、AG

5、Es使DM大鼠循環(huán)血液及冠狀動(dòng)脈組織中ANGⅡ的濃度增高,冠狀動(dòng)脈組織中AT1 mRNA及蛋白表達(dá)水平增高,給予氨基胍干預(yù)可以使DM大鼠冠狀動(dòng)脈ANGⅡ-AT1水平下降;4、給予纈沙坦干預(yù)不能影響DM大鼠冠狀動(dòng)脈AGEs-RAGE水平,可以降低DM大鼠冠狀動(dòng)脈ANGⅡ-AT1水平,提高冠狀動(dòng)脈血管環(huán)收縮及舒張反應(yīng)性,改善冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮組織的超微結(jié)構(gòu),增加冠狀動(dòng)脈組織中eNOS蛋白表達(dá),減少冠狀動(dòng)脈組織中ET-1、NF-κB蛋白表達(dá)。