ABT-724對(duì)SHR大鼠行為及小腦多巴胺D4受體表達(dá)影響的研究.pdf

1、[背景]:
　　 注意缺陷多動(dòng)障礙(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)是一種常見(jiàn)的兒童期起病的神經(jīng)行為障礙，主要表現(xiàn)為與發(fā)育水平不相稱的一系列行為異常，如不分場(chǎng)合的多動(dòng)、沖動(dòng)以及注意力分散。ADHD是一種影響終身的慢性疾病，若不早期進(jìn)行干預(yù)治療，隨著年齡的增長(zhǎng)，70％的患兒癥狀持續(xù)至青春期，30％的患兒癥狀持續(xù)至成人，對(duì)患者的學(xué)業(yè)、行為調(diào)控、社會(huì)生活等方面產(chǎn)生廣泛而消極的

2、影響。其發(fā)病機(jī)制至今尚未闡明。研究表明，ADHD的發(fā)生與發(fā)展可能與多巴胺D4受體異常表達(dá)有關(guān)。既往對(duì)ADHD發(fā)病機(jī)制的研究主要集中在前額葉皮層，紋狀體和基底節(jié)等腦區(qū)。近年來(lái)研究者對(duì)ADHD患兒的腦部磁共振成像掃描時(shí)發(fā)現(xiàn)其小腦總?cè)萘坑绕涫切∧X蚓部容量比正常兒童顯著減少。并且人們對(duì)小腦在注意力、沖動(dòng)情緒控制、認(rèn)知等方面的作用有了新的認(rèn)識(shí)。這些發(fā)現(xiàn)為深入研究ADHD的發(fā)病機(jī)制提供了新的切入點(diǎn)。本研究選擇最常用的ADHD動(dòng)物模型即自發(fā)性高血壓大

3、鼠(spontaneously hypertensive rat，SHR)作為研究載體，采用選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724進(jìn)行干預(yù)，觀察ABT-724對(duì)SHR大鼠認(rèn)知行為及其小腦多巴胺D4受體表達(dá)的影響，探討小腦多巴胺系統(tǒng)功能異常在ADHD發(fā)病機(jī)制中的可能作用，并為尋找治療ADHD的新靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。
　　 [方法]:
　　 1.觀察幼年SHR/WKY/SD大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。利用開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)、Morris水迷宮、

4、Làt迷宮三種試驗(yàn)方法，分別觀察SHR/WKY/SD大鼠自發(fā)活動(dòng)水平、空間學(xué)習(xí)和記憶能力、非選擇性注意力。
　　 2.研究選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724對(duì)SHR行為的影響。分別用ABT-724低(0.04mg/kg)、中(0.16mg/kg)、高(0.64mg/kg)三個(gè)劑量及哌甲酯(5mg/kg)干預(yù)SHR，并用未干預(yù)(生理鹽水1ml/kg)SHR作為對(duì)照，利用開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)、Morris水迷宮、Làt迷宮，觀察干預(yù)前后S

5、HR自發(fā)活動(dòng)水平、空間學(xué)習(xí)和記憶能力、非選擇性注意力。
　　 3.探討選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724對(duì)SHR小腦多巴胺D4受體表達(dá)的影響。行為學(xué)測(cè)試結(jié)束后，利用免疫組織化學(xué)及實(shí)時(shí)定量RT-PCR技術(shù)檢測(cè)SHR/WKY/SD大鼠及干預(yù)前后SHR小腦多巴胺D4受體的表達(dá)。
　　 [結(jié)果]:
　　 1.觀察幼年SHR/WKY/SD大鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。在開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)中，SHR穿越格子數(shù)(94.50±22.51)較WK

6、Y(6±3.12)和SD大鼠(63.63±22.33)明顯增多（p均＜0.05）。在Morris水迷宮中，SHR大鼠(21.38±5.01)與SD大鼠(41.13±6.10)相比，空間記憶能力降低(p＜0.05);WKY大鼠(24.88±9.31)則表現(xiàn)出明顯的漂浮特征。SHR大鼠在Làt迷宮中直立次數(shù)(138.63±31.89)明顯多于WKY(19.36±17.69)及SD大鼠(76.88±32.80)(p＜0.05)，后二者無(wú)明顯差

7、別(p＞0.05)。
　　 2.研究選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724對(duì)SHR行為的影響。哌甲酯及ABT-724干預(yù)后的SHR大鼠穿越格子數(shù)(分別為70.67±8.59，76.50±10.75，79.17±10.44，65.67±20.62)較鹽水組大鼠(130.33±11.40)明顯減少（p均＜0.05）。在Morris水迷宮中，干預(yù)后的SHR大鼠空問(wèn)記憶能力(分別為52.50±4.04，52.17±2.99，61±8.

8、15，53.83±9.87)與鹽水組大鼠(38.83±7.17)相比明顯提高（p均＜0.05）。在Làt迷宮中，干預(yù)后的SHR大鼠直立次數(shù)（分別為57.17±5.67,60.83±8.28,55.17±9.45,65.33±9.50）與鹽水組大鼠(78.00±13.84)相比明顯減少（p均＜0.05）。
　　 3.探討選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724對(duì)SHR小腦多巴胺D4受體表達(dá)的影響。SHR小腦多巴胺D4受體累計(jì)光密度

9、值(IOD)（2016900±494060）及mRNA表達(dá)(0.63±0.12)均較WKY/SD大鼠顯著減低（p均＜0.05），后二者比較無(wú)明顯差別。ABT-724低、中、高劑量和哌甲酯干預(yù)后SHR小腦多巴胺D4受體IOD及mRNA表達(dá)較鹽水組均顯著升高（p均＜0.05）。
　　 [結(jié)論]:
　　 1.SHR幼鼠作為ADHD最常用的一種動(dòng)物模型，與WKY、SD大鼠相比較，分別在開(kāi)場(chǎng)試驗(yàn)、Làt迷宮、Morris水迷宮中表

10、現(xiàn)出明顯的多動(dòng)、沖動(dòng)，注意力不集中以及認(rèn)知功能障礙。本課題在增加了另一品系大鼠（即SD大鼠）的基礎(chǔ)上，對(duì)SHR的自發(fā)活動(dòng)水平、非選擇性注意力、認(rèn)知功能再次進(jìn)行檢測(cè)、評(píng)估，為進(jìn)一步的研究奠定了理論基礎(chǔ)。
　　 2.ABT-724干預(yù)后的SHR表現(xiàn)出自發(fā)活動(dòng)減低、認(rèn)知功能及非選擇性注意力改善，其效果與哌甲酯干預(yù)后效果相近，提示選擇性多巴胺D4受體激動(dòng)劑ABT-724對(duì)SHR的行為認(rèn)知有明顯的改善作用。
　　 3.在SHR/W