枸杞子“走油變色”化學物質(zhì)基礎及飲片貯藏養(yǎng)護研究.pdf

1、中藥貯藏的歷史最早可追溯到商周時期，古人在長期醫(yī)療實踐中逐漸認識到貯藏的重要性，并形成了獨具特色的中藥貯藏養(yǎng)護方法?！爸兴幧唐肺锪鞅Ｙ|(zhì)論”認為貯藏時間、貯藏方法、包裝方式、包裝材料等環(huán)節(jié)對中藥品質(zhì)均有不同程度影響。隨著中藥需求量的不斷擴大，有效解決中藥貯藏過程保質(zhì)的問題成為當務之急，對保證中藥流通環(huán)節(jié)的質(zhì)量，確保用藥安全有效具有重要意義。
　　歷代醫(yī)家基于長期貯藏養(yǎng)護實踐經(jīng)驗，總結出貯藏中“易走油變色”的中藥有苦杏仁、枸杞子、菊花

2、、桔梗等含脂肪油、糖類及性質(zhì)不穩(wěn)定成分較多的藥材。枸杞子為茄科植物寧夏枸杞Lycium barabarum L.的干燥成熟果實，主產(chǎn)于寧夏、甘肅、青海等省區(qū)，以寧夏產(chǎn)為道地，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為上品。本品味甘，性平，具有滋補肝腎，益精明目的功效，用于虛勞精虧，腰膝酸痛，眩暈耳鳴，陽痿遺精，內(nèi)熱消渴，血虛萎黃，目昏不明等癥。藥材傳統(tǒng)以粒大、肉厚、子少、色紅、圓熟、質(zhì)柔潤、味甜、無蟲霉蛀者為佳。枸杞子鮮果成熟期主要集中在6～9月，皮薄

3、汁多不耐貯存;因果實中含大量糖類成分貯藏溫度過高易外溢，導致走油發(fā)粘，且不易保持原有色澤，貯藏不當易變暗，因而成為貯藏中“易走油變色”中藥的代表。枸杞子在不同包裝、貯藏條件下，外觀性狀、有效成分含量差異較大，本文以提高飲片質(zhì)量和療效為宗旨，對枸杞子中“走油變色”的化學物質(zhì)基礎及貯藏養(yǎng)護進行研究，并提高了飲片質(zhì)量標準。通過研究切實解決“易走油變色”中藥飲片存在的關鍵共性問題，為飲片的包裝貯藏提供科學依據(jù)，逐步實現(xiàn)飲片質(zhì)量標準及貯藏養(yǎng)護的規(guī)

4、范化。
　　本文對枸杞子的產(chǎn)地和貯藏養(yǎng)護歷史進行了本草學的回顧性研究，在其現(xiàn)有研究基礎上，針對貯藏中“易走油變色”的特點，首次闡明了枸杞子“走油變色”的化學物質(zhì)基礎變化內(nèi)涵，并對枸杞子飲片的質(zhì)量標準進行了完善提高，在標準中增加了色素類成分蘆丁和類胡蘿卜素的含量指標，建立了測定方法。
　　目前中藥飲片的臨床應用形式有傳統(tǒng)飲片及新型飲片兩大類，其中新型飲片有顆粒飲片、壓塊飲片、超微飲片、免煎中藥飲片（即中藥配方顆粒）、定量小包裝

5、飲片等，為了滿足中醫(yī)傳統(tǒng)用藥習慣同時方便病人服藥，減少飲片中間環(huán)節(jié)污染，保證劑量準確，本文以枸杞子定量小包裝新型飲片為研究對象，針對枸杞子“走油變色”的化學物質(zhì)基礎量變，對其貯藏養(yǎng)護方法進行了研究，首次考察了包裝材料和枸杞子飲片的相容性，明確了該飲片適用的包裝材料。主要研究內(nèi)容及結果如下:
　　1.枸杞子“走油變色”的化學物質(zhì)基礎變化內(nèi)涵研究
　　枸杞子貯藏中“易走油變色”的特性，是歷代醫(yī)家基于長期貯藏養(yǎng)護實踐的經(jīng)驗總結。本

6、文首次對“走油變色”前后枸杞子的化學物質(zhì)基礎進行了比較，結果如下:
　　1.1枸杞子“走油”化學物質(zhì)基礎研究
　　傳統(tǒng)認為中藥“走油”常與藥材中糖類、脂肪油等成分較多有關，枸杞子中富含多糖，本文對枸杞子“走油”前后枸杞多糖的含量變化進行研究，結果表明，“走油”前后多糖含量差異較大，并呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢。貯藏3月外觀開始出現(xiàn)“走油”，此時多糖含量降低30％～50％，貯藏6月降低程度逐漸平緩，貯藏12月時51批樣品中的25批多糖

7、含量已低于藥典規(guī)定。伴隨枸杞子貯藏中“走油”現(xiàn)象的發(fā)生，多糖含量隨之降低，提示枸杞多糖為枸杞子“走油”的化學物質(zhì)基礎。其中枸杞子“走油”實與藥材中多糖類成分外溢，使外觀發(fā)粘泛油樣有關，傳統(tǒng)意義上“走油”中的“油”實指構杞多糖而非脂肪油，其中“走油”前后枸杞多糖的組成及結構變化產(chǎn)物有待進一步深入研究。
　　1.2枸杞子“變色”化學物質(zhì)基礎研究
　　傳統(tǒng)認為中藥“變色”多因藥材中含有不穩(wěn)定的色素類成分，枸杞子中色素類成分有酚酸類

8、，脂溶性色素及水溶性色素等，本文首次較系統(tǒng)的研究了枸杞子“變色”前后色素類成分的含量變化，其中水溶性色素以蘆丁為代表，脂溶性色素以類胡蘿卜素為代表，二者“變色”前后含量差異較大，均呈現(xiàn)降低趨勢，貯藏3月外觀開始出現(xiàn)“變色”，此時蘆丁含量降低10％～30％，隨后降低程度趨于平緩;貯藏12月時含量降低30％～50％;類胡蘿卜素含量貯藏3月時即降低50％～70％，貯藏12月時含量降低70％～90％，故確定蘆丁，類胡蘿卜素為枸杞子“變色”的特征

9、性成分，其中對“變色”前后水溶性色素/脂溶性色素的比例變化有待進一步深入。
　　2.枸杞子飲片質(zhì)量標準的研究提高
　　目前現(xiàn)行中藥飲片質(zhì)量標準及相關研究，缺乏專屬性強的質(zhì)量控制方法及評價模式，未將其貯藏過程中外觀性狀、化學成分等變化的特征性指標納入飲片整體質(zhì)量標準中。本文通過研究闡明了枸杞子“走油變色”的化學物質(zhì)基礎變化內(nèi)涵;建立了色素類成分蘆丁及類胡蘿卜素的含量測定方法，并制定限量標準，規(guī)定蘆丁含量不得少于0.25mg/g

10、，類胡蘿卜素含量以β-胡蘿卜素計，不得少于0.10mg/g。同時將甜菜堿的含量測定方法進一步簡便準確化，由藥典使用的薄層掃描法改為HPLC法;提高了枸杞子飲片的質(zhì)量標準，為枸杞子飲片及其制劑的質(zhì)量控制提供了依據(jù)。由于時間關系，僅收集到5個產(chǎn)地的枸杞子商品及藥材共10批，樣本量有待進一步擴大。
　　3.小包裝枸杞子飲片包裝材料的選擇及調(diào)查研究
　　3.1小包裝中藥飲片的應用現(xiàn)狀及相關問題探討
　　至今中藥湯劑仍是中醫(yī)臨床

11、應用的首選劑型，其配方調(diào)劑歷來使用散裝飲片、“手抓戥稱”。然而隨著社會的進步發(fā)展，這一方式存在的稱不準、分不勻、效率低、復核難、貯藏難、浪費大、衛(wèi)生差等弊端日益凸顯，特別是稱量不準、分劑不均的問題，影響了中醫(yī)臨床療效。國家中醫(yī)藥管理局于2007年8月在全國選擇19家中醫(yī)院開展小包裝中藥飲片的試點工作，并于2008年下發(fā)《關于印發(fā)小包裝中藥飲片醫(yī)療機構應用指南的通知》，在全國中醫(yī)院推廣使用小包裝中藥飲片。這種新型飲片包裝形式保持了飲片原有

12、性狀及傳統(tǒng)中醫(yī)臨床用藥特色，按設定劑量包裝、可直接“數(shù)包”配方，使劑量準確化，配方簡便化、高效化，易于復核，滿足了患者的知情權。但相較于傳統(tǒng)散裝飲片，定量小包裝也存在諸多不足，如調(diào)劑時占用空間增加，品規(guī)量有限，成本提高等問題。
　　通過對四川省中藥飲片股份有限公司、四川新荷花中藥飲片股份有限公司，成都中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院藥房及藥劑科的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，小包裝中藥飲片均采用聚乙烯塑料袋全透明或半透明包裝，在包裝袋上均有品名、規(guī)格、產(chǎn)地等說明文

13、字;包裝方法有密封包裝，抽真空包裝等，但聚乙烯塑料袋透氣性較差，易致飲片變質(zhì)，且在環(huán)境中降解時間長，不利于環(huán)保;由于目前多參照化工行業(yè)標準使用色標管理，包裝袋或標簽上使用的著色劑、油墨及有害物質(zhì)對飲片的安全性影響，包裝材料與飲片相容性研究尚無文獻報道;同時未見對飲片包裝前原料制定相應質(zhì)量標準，每袋飲片最低裝量限度尚無檢查要求等;以枸杞子小包裝飲片為例，其品規(guī)量為5g，10g，15g三種，品規(guī)數(shù)有限不能完全滿足臨床用藥需求。
　　以

14、上研究表明目前小包裝中藥飲片亟待建立質(zhì)量控制體系，對飲片原料，裝量，有效期，包裝材料及與藥材相容性，貯藏養(yǎng)護等進行系統(tǒng)研究，以利于提高中藥飲片的品質(zhì)，促進小包裝中藥飲片的發(fā)展。
　　3.2包裝材料的選擇及與枸杞子飲片相容性的初步研究
　　藥品包裝材料對保證藥品穩(wěn)定性起著重要作用，將直接影響用藥安全。由于藥品包裝材料組成配方、所選原輔料及生產(chǎn)工藝不同，導致不恰當材料引起活性成分的遷移，吸附甚至發(fā)生化學反應，使藥物失效或產(chǎn)生嚴重

15、副作用，因此要求藥品選擇包裝容器前，必須充分評價其對藥物穩(wěn)定性的影響，進行相容性試驗。目前小包裝中藥飲片的常用包裝材料有聚乙烯塑料單膜，紙/塑、鋁/塑復合膜，纖維濾紙，無紡布等。為充分體現(xiàn)中藥“簡便廉效”的優(yōu)勢，本文選擇聚乙烯(PE，Polyethylene)塑料膜、牛皮凝膜紙（即牛皮紙/PE塑料復合材料）、聚乙烯鋁箔復合膜（即鋁箔/聚乙烯塑料復合材料）3種包裝材料對寧夏枸杞子飲片進行密封包裝，陰涼恒溫條件貯藏12月后取出，以包裝材料與

16、藥物相容性為切入點，運用GC-MS方法測定3種空白包裝材料、3種已包裝材料及3種被包裝枸杞子飲片中的有機殘留物進行比較研究。
　　結果表明，對不同包裝材料進行GC-MS比較分析，揮發(fā)性溶劑乙醇、丙酮為空白聚乙烯塑料袋所特有，異丙醇、正戊醇為空白牛皮凝膜紙袋所特有，裝有枸杞子12個月的牛皮凝膜紙袋及聚乙烯塑料袋中均含有苯甲醛。塑料包裝材料中常用添加劑抗氧化劑BHT與BHA常并用，且均有一定毒性。BHT在三種空白包裝材料中均含有，BH

17、A僅在空白牛皮凝膜紙袋中含有，參照《藥品包裝用復合膜、袋通則》及《食品容器、包裝材料用添加劑使用衛(wèi)生標準》中對添加劑最大使用量的規(guī)定，二者均大于其最大使用量0.1％，兩種抗氧化劑向枸杞子飲片的遷移量也大于0.1％。通過綜合考慮，得出聚乙烯鋁箔復合膜袋更適于枸杞子飲片的包裝。由于時間關系，本部分內(nèi)容中包裝材料與枸杞子飲片中化學成分的遷移規(guī)律及定量分析有待進一步研究。
　　4.對小包裝中藥飲片枸杞子貯藏養(yǎng)護方法的研究
　　現(xiàn)行2

18、000版《藥品經(jīng)營質(zhì)量管理規(guī)范》（GSP，Good Supply Practice）對藥品倉儲設施及儲藏條件做出規(guī)定，但內(nèi)容主要針對藥材及散裝飲片，由于小包裝飲片GSP中未作規(guī)定，因此亟待進行貯藏養(yǎng)護研究。枸杞子古時多采用醇悶酒浸法貯藏，現(xiàn)《中國藥典》2010年版一部枸杞子項下規(guī)定“置于陰涼干燥處，防悶熱，防潮，防蛀”。本研究結合枸杞子“易走油變色”的特點及藥典規(guī)定，按照GSP有關藥品儲藏要求，采用單因素實驗法，選擇3種包裝材料(PE塑

19、料膜、牛皮凝膜紙、聚乙烯鋁箔復合膜)、2種包裝方式（抽真空密封，密封）對三個產(chǎn)地的枸杞子（寧夏，甘肅，新疆）包裝，分別于3種貯藏條件下（低溫冷藏2℃～10℃、陰涼恒溫20℃、常溫0℃～30℃）貯藏，于0月、3月、6月、12月對枸杞子飲片按照完善提高的質(zhì)量標準進行研究，實驗結果如下:
　　(1)性狀:枸杞子抽真空包裝貯藏3月開始出現(xiàn)“走油”，表明因枸杞子果皮較薄，抽真空造成藥材擠壓皺縮導致多糖外溢，進而出現(xiàn)走油發(fā)粘;數(shù)據(jù)結果進一步證

20、實在相同包裝材料、貯藏條件下，多糖含量抽真空密封包裝＜密封包裝;顯示枸杞子飲片不宜采用抽真空的包裝方式。貯藏6月開始枸杞子顏色有較明顯加深，僅同一批次新疆枸杞子的顏色變化較小，對該批樣品檢查發(fā)現(xiàn)經(jīng)硫熏。
　　(2)考察貯藏中避光與否對色素類成分的影響:避光與否對脂溶性色素-類胡蘿卜素的含量影響較大，類胡蘿卜素含量未避光貯藏明顯低于避光貯藏;而對水溶性色素-蘆丁的含量影響不明顯，本研究結果與文獻報道一致，提示《中國藥典》枸杞子項下應

21、增加“避光”貯藏。其中光照強度與類胡蘿卜素的量變關系有待進一步研究。本研究對“易變色”中藥飲片的貯藏養(yǎng)護具有一定借鑒作用。
　　(3)水分變化:枸杞子飲片貯藏3月開始水分含量逐漸增加，貯藏12月后，水分含量仍符合藥典規(guī)定，僅低溫冷藏條件下，采用密封、牛皮凝膜紙包裝的樣品水分超標，表明此包裝方式不適于枸杞子飲片的貯藏。
　　(4)各指標性成分的變化:枸杞子飲片中枸杞多糖含量貯藏3月降低30％～50％，貯藏12月近一半樣品含量低

22、于藥典規(guī)定;提示枸杞子中多糖含量不穩(wěn)定，使用時應加快流通周轉速度;其中包裝方式、貯藏溫度對多糖含量影響較大，枸杞多糖含量:常壓密封＞抽真空密封;低溫冷藏＞陰涼恒溫＞常溫;聚乙烯鋁箔復合膜＞聚乙烯塑料袋＞牛皮凝膜紙。甜菜堿含量變化不明顯，貯藏12月僅降低20％～30％，含量遠高于藥典標準，提示單以甜菜堿作為枸杞子的特征性評價指標有一定局限性。蘆丁含量顯示逐漸降低的規(guī)律，貯藏3月即降低10％～30％，隨后降低趨于平緩，貯藏12月降低30％～