冠心病患者血漿中血管過氧化物酶水平變化與血管炎癥反應研究.pdf

1、研究目的：本實驗旨在觀察冠心病患者血漿中血管過氧化物酶(VPO)的變化，在內皮細胞中初步探討腫瘤壞死因子-α(TNF-α)誘導VPO參與血管炎癥反應的作用機制。 方法：本研究分為臨床研究和細胞實驗，臨床研究共納入139名冠心病(CAD)患者及47名健康體檢者，所有研究對象分為三組，急性冠脈綜合征組(ACS)72名，穩(wěn)定型心絞痛組(SAP)67名和正常對照組(Control)47名。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)法檢測血漿中TN

2、F-α和髓過氧化物酶(MPO)水平；采用Western-Blot檢測血漿中VPO和MPO的表達。細胞研究：培養(yǎng)內皮細胞，采用Western-Blot檢測內皮細胞的VPO表達，采用熒光法檢測細胞內ROS水平，采用ELISA法檢測細胞上清液中TNF-α水平。數據以均數士標準差(-x±S.E.M.)表示，采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學處理。兩組比較用t檢驗，多組間比較采用ANOVA方差分析進行檢驗。雙側P<0.05判斷為有統(tǒng)計學差異。

3、 結果： 1.ACS和SAP患者血漿中TNF-α、VPO水平明顯高于正常對照組(P<0.01，P<0.01)，且ACS組顯著高于SAP組，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；ACS組患者血漿中MPO水平顯著高于SAP組和正常對照組(P<0.01)，SAP組患者血漿中MPO水平高于正常對照組，但兩組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 2.ox-LDL呈時間和濃度依賴性地升高內皮細胞培養(yǎng)上清液中TNF-α水

4、平；ox-LDL(100 mg/L)呈時間依賴性地上調內皮細胞VPO表達，升高細胞內ROS水平。 3.ox-LDL(100 mg/L，24h)可促進內皮細胞VPO表達并升高細胞內ROS水平，預先給予細胞內抗氧化劑吡咯二硫代氨基甲酸乙酯(PDTC)(100μM)孵育細胞1h后，加入ox-LDL(100 mg/L)孵育細胞24h，可顯著抑制ox-LDL誘導的內皮細胞VPO的表達及細胞內ROS水平的增加，單獨給予PDTC(100μM)