大鼠腦內(nèi)注射Aβ-,1-40-致海馬損傷的炎癥相關(guān)機(jī)制及通絡(luò)救腦口服液的作用.pdf

1、目的:觀察通絡(luò)救腦口服液對雙側(cè)海馬注射Aβ<,1-40>建立的AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響及其干預(yù)的分子機(jī)制，為該藥臨床應(yīng)用提供科學(xué)的依據(jù)。 方法：鼠齡8-12周的SD雄性大鼠140隨機(jī)分為通絡(luò)救腦口服液低劑量組(12mgkg<'-1>d<'1>)、通絡(luò)救腦口服液中劑量組(24 mgkg<'-1>d<'1>)、通絡(luò)救腦口服液高劑量組(48mgkg<'-1>d<'1>)、模型組、鹽酸多奈哌齊組、假手術(shù)組和空白對照組共七組。采用大

2、鼠大腦海馬立體定向注射β-淀粉樣蛋白<,1-40>建立AD大鼠模型，復(fù)制AD模型后第三天通絡(luò)救腦口服液組、鹽酸多奈哌齊組給藥干預(yù)共28天后檢測各項(xiàng)指標(biāo)。采用Moms水迷宮測試大鼠尋找平臺(tái)所需時(shí)間和通過原平臺(tái)次數(shù)以檢測大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的變化，取海馬組織電鏡觀察超微結(jié)構(gòu)的變化，采用免疫組織化學(xué)染色和計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)測定海馬區(qū)AChE、ChAT、NF-kB、CRP、NOS和SS蛋白陽性目標(biāo)積分光密度以檢測其表達(dá)的變化，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR

3、法(SYBR Green Ⅰ嵌合熒光法)檢測Bax、Bc1-2、APP、BACE1 mRNA表達(dá)的變化，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法檢測血清TNFα和IL-1β含量的變化，采用免疫印跡法檢測SYP和caspase-3蛋白含量的變化，采用分光光度法檢測了SOD、MDA、MAO酶活性的變化，采用熒光分光光度法檢測了脂褐素的含量變化，以及通絡(luò)救腦口服液對上述指標(biāo)的影響。 結(jié)論： 1、大鼠大腦海馬立體定向注射β-淀粉樣蛋白

4、140建立的AD大鼠模型，較好的模擬了老年性癡呆的改變，可作為老年性癡呆的動(dòng)物模型之一。2、通絡(luò)救腦口服液對擬AD模型大鼠腦內(nèi)海馬組織超微病理改變具有改善作用。3、通絡(luò)救腦口服液可顯著改善擬AD模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶障礙，這可能與它具有提高ChAT、NOSl、SS和synapsin蛋白表達(dá)，降低AChE蛋白表達(dá)有關(guān)。4、通絡(luò)救腦口服液可抑制促凋亡基因Bax mRNA和caspase-3蛋白表達(dá)，促進(jìn)抗凋亡基因Bc1-2 mRNA的表達(dá)，從而