層粘連蛋白及Ⅲ型膠原蛋白與LASEK和PRK手術(shù)后HAZE的形成關(guān)系.pdf

1、[目的]：利用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，通過(guò)免疫學(xué)方法定位層粘連蛋白(Laminin，LN)及Ⅲ型膠原蛋白(collagenⅢ，colⅢ)在LASEK和PRK手術(shù)前后角膜中的表達(dá)分布，并通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢測(cè)它們的表達(dá)量，從而探討屈光手術(shù)后ECM的表達(dá)與HAZE的關(guān)系。 [方法]：將30只大鼠隨機(jī)分為術(shù)后1天、2天、1周、2周、4周及正常對(duì)照組，共六組。每組5只大鼠(10只眼)。每支大鼠左眼行PRK手術(shù)，右眼行LASEK手術(shù)。由同一眼科醫(yī)師對(duì)大鼠施

2、行雙眼準(zhǔn)分子激光手術(shù)。分別于術(shù)后第1天、第2天、第1周、第2周及第4周用斷髓方法處死后立即摘取眼球?？漆t(yī)人公司鷹式世紀(jì)波準(zhǔn)分子激光機(jī)能量密度為120Mj/cm2，激光頻率10HZ，脈沖能量220mJ，設(shè)計(jì)矯正度數(shù)-2.00D。切削直徑約4.5mm，深度約15um3％戊巴比妥鈉液以1ml/kg腹腔皮下注射以全身麻醉，并予以0.05％愛(ài)爾凱因滴眼液點(diǎn)眼局麻后行LASEK和PRK手術(shù)。術(shù)后兩眼均滴典必殊滴眼液，4次/日，氯霉素滴眼液，6次/日

3、，迪可羅眼膏，睡前1次/日，每周兩種滴眼液各減一滴。所有標(biāo)本中均無(wú)感染征象。摘取標(biāo)本后用中性甲醛(PH7.4)固定4℃保存24h，，常規(guī)石蠟包埋(標(biāo)本的長(zhǎng)軸與石蠟表面垂直)，制成約5um石蠟切片。 [結(jié)果]： 1.HE染色結(jié)果顯示：(1)LASEK組：1d上皮瓣細(xì)胞層比鄰近區(qū)域增厚，上皮層輕度水腫，上皮層基底細(xì)胞比未損傷區(qū)域體積大，膠原排列基本規(guī)則；1w少數(shù)上皮基底細(xì)胞核深染，較多基底細(xì)胞呈空泡樣變性，排列較亂，膠原排列

4、輕微紊亂；4w上皮層明顯增厚達(dá)7-8層細(xì)胞，且排列紊亂，多數(shù)基底細(xì)胞排列不規(guī)則，增殖明顯，膠原排列紊亂.(2)PRK組：1d未見(jiàn)或僅有1層上皮細(xì)胞覆蓋切削區(qū)，細(xì)胞排列輕微紊亂，形態(tài)未見(jiàn)明顯異常，切削區(qū)外上皮層厚度正常，膠原排列基本規(guī)則；1w上皮層增厚到4層或5層，上皮細(xì)胞體積開始增大，上皮基底細(xì)胞出現(xiàn)空泡樣變性且排列紊亂，基質(zhì)細(xì)胞數(shù)開始增多，膠原排列不規(guī)則；4w上皮層繼續(xù)增厚甚至達(dá)9層，切削區(qū)比周圍區(qū)域增厚顯著，整個(gè)上皮水腫，基底細(xì)胞排

5、列不規(guī)則，膠原排列很疏松、紊亂，基質(zhì)細(xì)胞增殖明顯。 2．免疫組化染色法結(jié)果：在正常的角膜組織中，LN僅在基底層柱狀上皮細(xì)胞胞漿、胞間和角膜基質(zhì)中微量表達(dá)，于前彈力層表達(dá)，為標(biāo)志前彈為層的一條“線”。LASEK術(shù)后4小時(shí)即可觀察到微弱的LN顯色，且一直持續(xù)到術(shù)后四周。對(duì)于PRK，從術(shù)后第二天至術(shù)后四周均可見(jiàn)LN表達(dá)，且表達(dá)逐漸增強(qiáng)。 正常角膜中不表達(dá)colⅢ，LASEK和PRK都于術(shù)后第一周開始表達(dá)，持續(xù)到術(shù)后第四周。但是，LAE