鈦氧薄膜材料表面層粘連蛋白修飾以及內(nèi)皮化研究.pdf

1、本文采用非平衡磁控濺射沉積技術(shù)制備了具有金紅石與銳鈦礦混合結(jié)構(gòu)的鈦氧(Ti-O)薄膜，并在此基礎(chǔ)上，對(duì)Ti-O薄膜進(jìn)行表面生物化改性。通過(guò)氫氧化鈉(NaOH)活化處理使Ti—O薄膜表面產(chǎn)生活性基團(tuán)-OH，并通過(guò)硅烷偶聯(lián)劑氨丙基三乙氧基硅烷(APTE)固定細(xì)胞外基質(zhì)中的層粘連蛋白(Ln)。另外，采用傅立葉變換紅外光譜儀(FTIR)、X射線光電子能譜(XPS)、原子力顯微鏡(AFM)、掃描電子顯微鏡(SEM)、接觸角測(cè)量等方法對(duì)每一步處理后

2、的樣品表面進(jìn)行了特征測(cè)試與分析，最后通過(guò)體外人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)原代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)和血小板粘附實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)固定Ln前后Ti-O薄膜表面細(xì)胞相容性以及血液相容性。 Ti-O薄膜經(jīng)NaOH活化后，F(xiàn)TIR結(jié)果顯示表面可產(chǎn)生親水性基團(tuán)-OH；XPS結(jié)果顯示一OH對(duì)應(yīng)的O峰位增強(qiáng)；接觸角減小，薄膜表面親水性提高。在活化的Ti-O膜表面涂覆APTE后，F(xiàn)TIR及XPS結(jié)果表明APTE中的乙氧基水解后可以和Ti-O膜表面的羥基基團(tuán)反應(yīng)，

3、使APTE化學(xué)鍵合到Ti—O膜表面；SEM及AFM結(jié)果顯示表面形貌變化不大，接觸角增加，親水性降低。在Ti-O薄膜表面偶聯(lián)固定Ln后，F(xiàn)TIR結(jié)果顯示樣品表面出現(xiàn)蛋白中的特征基團(tuán)酰胺Ⅰ帶、酰胺Ⅱ帶基團(tuán)；XPS結(jié)果顯示樣品表面出現(xiàn)S元素，說(shuō)明Ln已經(jīng)固定于Ti-O薄膜表面；表面接觸角進(jìn)一步增大，親水性提高，樣品表面更加致密。 體外人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Ti—O薄膜本身具有一定的內(nèi)皮細(xì)胞親和性，在Ti-O薄膜表面固定Ln

4、對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)有良好的促進(jìn)作用，且在Ti-O薄膜表面通過(guò)APTE偶聯(lián)固定Ln比直接固定Ln能使細(xì)胞更好的粘附和生長(zhǎng)。 血小板粘附實(shí)驗(yàn)顯示，通過(guò)APTE偶聯(lián)固定Ln不僅能促進(jìn)Ti-O薄膜表面的內(nèi)皮細(xì)胞化，同時(shí)能抑制Ti-O薄膜表面的血小板粘附和激活，提高材料表面的血液相容性。 以上的試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)對(duì)Ti-O薄膜表面活化偶聯(lián)，可以將Ln成功固定在Ti—O薄膜表面.在Ti—O薄膜表面固定Ln對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)有良好的促進(jìn)作