解毒散結(jié)方對甲狀腺功能亢進(jìn)癥的療效及機(jī)制研究.pdf

1、目的：對一種治療甲狀腺功能亢進(jìn)癥的臨床經(jīng)驗方（解毒散結(jié)方以下簡稱解毒方）進(jìn)行較全面系統(tǒng)的療效考察及機(jī)制研究，著眼甲亢臨床伴隨的主要問題如甲狀腺腫大、甲亢性心臟病(hyperthyroidism heart disease，HHD)、甲亢性肝臟病、甲亢伴自身免疫性甲狀腺炎，針對不同病癥各個入手解決，尋找不同問題共性之處（共同指標(biāo)的考察），解決以上問題亦是對甲亢之根本解決，探討藥物對甲亢之確切療效機(jī)制。為臨床用藥提供更好的指導(dǎo)及新藥開發(fā)提供

2、全面的藥效學(xué)研究資料。
　　方法：
　　1.解毒方對左旋甲狀腺素鈉致大鼠甲亢陰虛模型的干預(yù)及治療作用研究
　　于上午10時進(jìn)行，以左旋甲狀腺素鈉750μg／kg／日灌胃給予動物。一日一次，連續(xù)21天造成大鼠甲亢陰虛模型（甲亢性心臟?。?，給藥方式為干預(yù)給藥（造模的同時給藥）和治療給藥（造模后給藥治療一周）。結(jié)束后考察各組動物血清三碘甲腺原氨酸（T3）、血清四碘甲腺原氨酸（T4）、血清促甲狀腺激素(TSH)含量；血清總蛋白

3、、白蛋白、血脂、血糖；測定血漿胰島素（INS）、血漿胰高血糖素（GC）、血漿腎上腺素（EPI）、血漿腦鈉肽（BNP）含量；心臟組織勻漿測定cAMP、cGMP、SOD、MDA和甲狀腺組織病理切片。
　　2.解毒方對丙基硫氧嘧啶致大鼠甲狀腺腫模型的作用研究
　　每日上午十時灌胃0.15g/kg2d丙基硫氧嘧啶建立大鼠甲狀腺腫模型，連續(xù)10d，同時于每日下午給予解毒方，持續(xù)15d，結(jié)束后考察各組動物前后體重變化，主要臟器系數(shù)，血清

4、三碘甲腺原氨酸（T3）、血清四碘甲腺原氨酸（T4）含量，血清甲狀腺球蛋白抗體（TG-Ab）、血清甲狀腺微粒體抗體（TM-Ab）、血清甲狀腺過氧化物酶抗體（TPO-Ab）和甲狀腺組織病理切片。
　　3.解毒方對自身免疫性甲狀腺炎大鼠自身抗體及組織病理結(jié)構(gòu)的影響
　　通過“碘化鈉+甲狀腺球蛋白”建立大鼠免疫性甲狀腺炎模型，并灌胃解毒方藥物，實驗結(jié)束后考察指標(biāo)有大鼠給藥前后體重變化；血清T3、T4、TSH以及免疫球蛋白（IgG）、

5、總補(bǔ)體（CH50），甲狀腺球蛋白抗體（TG-Ab）、甲狀腺過氧化酶抗體（TPO-Ab）；WBC、RBC、HGB；觀察甲狀腺、胸腺組織形態(tài)學(xué)變化。
　　4.解毒方對大鼠甲亢肝陽上亢模型的干預(yù)作用研究
　　從造模第1天開始，給予大鼠灌胃附子湯10mL／(kg2d)，相當(dāng)于生藥2 g／(kg2d)，連續(xù)21天。在大鼠灌胃附子湯的第11天開始，同時給予優(yōu)甲樂1mg/(kg2d)灌胃，連續(xù)10天，造型均安排在每天上午定時進(jìn)行，解毒方藥

6、物為每日下午干預(yù)給藥?？疾熘笜?biāo)有每周記錄各組動物體重的變化；血清總蛋白、白蛋白、血脂、血糖、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、堿性磷酸酶(ALP)；血清T3、T4、TSH；血漿腎上腺素（EPI）、腦鈉肽（BNP）；肝組織cAMP、cGMP、SOD、MDA；計算肝臟、心臟、甲狀腺臟器系數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.解毒方三個劑量組均能夠降低甲狀腺激素，差異有極顯著性（p＜0.01），且對該模型的干預(yù)作用優(yōu)

7、于治療作用；解毒方干預(yù)組與治療組生化指標(biāo)與模型組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；解毒方0.72g/kg劑量組能夠升高SOD活性，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05），1.43g/kg劑量組能夠降低心肌cAMP活性，差異有極顯著性（p＜0.01）；解毒方0.72g原生藥/kg，1.43g原生藥/kg劑量組對甲狀腺組織炎癥狀態(tài)有較大的改善，能夠較好的抑制炎性細(xì)胞的浸潤；甲亢陰虛模型對照組腦鈉素（BNP）、腎上腺素（EPI）與 T3、T

8、4成正相關(guān)，與 TSH成負(fù)相關(guān)，胰島素（INS）、胰高血糖素（GC）與T3、T4成負(fù)相關(guān)，與TSH成正相關(guān)，解毒方對血漿腦鈉素（BNP）、胰島素（INS）有降低趨勢，1.43、2.86g（原生藥）／kg劑量組對血漿胰高血糖素（GC）差異有顯著性（p＜0.05），對血漿腎上腺素?zé)o明顯影響。
　　2.解毒方三個劑量(1.43、2.85、5.70g原生藥/kg.d)組、模型對照組、正常對照組的動物體重比較差異均無顯著性（p＞0.05）；

9、解毒方能夠抑制丙基硫氧嘧啶引起的大鼠甲狀腺腫，1.43、2.85 g原生藥/kg.d劑量組甲狀腺系數(shù)較模型組?。╬<0.01），差異有極顯著性；與模型組比較，解毒方三個劑量組能夠升高甲狀腺激素，2.85g原生藥/kg.d劑量組較顯著T3、T4（p＜0.05），差異有顯著性；與正常對照組比較，模型組TG-Ab含量有所降低，差異無顯著性， TM-Ab，TPO-Ab亦差異無顯著性，解毒方與模型對照組比較，三個劑量組TG-Ab、TM-Ab、TP

10、O-Ab含量亦差異無顯著性；與模型組比較，經(jīng)灌胃解毒方藥物后，1.43 g原生藥/kg.d與2.85 g原生藥/kg.d劑量組對甲狀腺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)有較大的改善，使病變甲狀腺腺體擴(kuò)張，抑制腺上皮細(xì)胞肥大增生，腺上皮扁平，濾泡內(nèi)膠體增多。
　　3.正常對照組、模型對照組、解毒方三個劑量組比較，各組動物體重增長變化基本一致(p＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；解毒散結(jié)方三個劑量組、模型對照組、正常對照組比較細(xì)胞免疫(WBC、RBC、HGB

11、)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05），提示該模型及藥物對動物的細(xì)胞免疫無影響；與模型對照組比較，解毒方1.43、5.70g原生藥/kg.d劑量組甲狀腺系數(shù)差異有顯著性（p＜0.05），解毒散結(jié)方2.85g原生藥劑量組甲狀腺系數(shù)差異有極顯著性（p＜0.01），提示解毒散結(jié)方可能對甲狀腺病理有改善作用；與模型對照組比較，解毒方1.43、2.85g原生藥/kg.d劑量組T3差異有顯著性（p＜0.05），提示解毒散結(jié)方可能對甲狀腺功能有一定的改

12、善作用；正常對照組、模型對照組、解毒散結(jié)方三個劑量組比較，各組動物特異性抗體（TG-Ab、TPO-Ab）與非特異性抗體（IgG、CH50）差異無顯著性(p＞0.05)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義，提示本實驗研究中模型及藥物均未對動物的特異性與非特異性指標(biāo)產(chǎn)生影響；模型對照組有部分甲狀腺濾泡及間質(zhì)被淋巴細(xì)胞浸潤，其腺上皮細(xì)胞未見增生、脫落病變。經(jīng)灌胃解毒方三個劑量組藥物，均能改變甲狀腺細(xì)胞的淋巴細(xì)胞浸潤炎性病變。模型對照組胸腺皮質(zhì)變薄萎縮，胸腺細(xì)胞

13、稀疏，淋巴細(xì)胞數(shù)目減少，皮髓質(zhì)界限不清，皮質(zhì)淋巴細(xì)胞明顯減少，網(wǎng)狀上皮細(xì)胞增多，有的淋巴細(xì)胞體積縮小，核固縮并有碎裂，經(jīng)灌胃解毒方三個劑量組藥物可較好的改善模型動物胸腺的炎性病變。
　　4.解毒方低、中劑量范圍內(nèi)均降低血清 T3、TSH；各組 TP（總蛋白）、GLU（血糖）、TC（總膽固醇）、ALT（谷丙轉(zhuǎn)氨酶）、ALB（白蛋白）指標(biāo)與模型組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）；模型對照組TG（甘油三酯）、AST（谷草轉(zhuǎn)氨酶）、

14、ALP（堿性磷酸酶）較正常組高，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（p＜0.05）；研究中造模藥物可能在受試藥物的干預(yù)作用下引起 ALT、AST升高，提示造模藥物與愛試藥物可能對肝細(xì)胞有毒性作用。模型組可見，見肝臟系數(shù)升高（p＜0.01）、心臟系數(shù)升高（p＜0.05），差異具有統(tǒng)計學(xué)意義；給藥組與模型組比較，給藥組均能夠降低肝臟、心臟系數(shù)，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義；模型對照組腦鈉素（BNP）、腎上腺素（EPI）與T3、TSH成負(fù)相關(guān)。提示甲亢伴肝臟病時可能會引

15、發(fā)腦鈉素（BNP）、腎上腺素的異常，從而對心臟內(nèi)分泌功能及腎上腺素能神經(jīng)功能產(chǎn)生影響。解毒散結(jié)方三個劑量組對腦鈉素（BNP）、腎上腺素（EPI）均升高，且具有統(tǒng)計學(xué)意義。提示造模藥物可能在受試物的干預(yù)作用下引發(fā)腦鈉素（BNP）、腎上腺素的升高，從而影響心功能的內(nèi)分泌及外周腎上腺素能神經(jīng)功能。
　　結(jié)論：通過對臨床甲亢伴隨的主要癥狀及指標(biāo)考察，建立了相關(guān)的大鼠甲亢伴心臟病模型（甲亢陰虛模型）、大鼠甲狀腺腫模型、甲亢伴肝病模型（甲亢肝