龍花方總黃酮提取分離及不同配比的主要藥效學(xué)比較研究.pdf

1、目的：對花生衣的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行初步研究；以總黃酮含量為指標(biāo)對龍花方中仙鶴草、花生衣的提取工藝進(jìn)行考察，優(yōu)選提取工藝條件；以總黃酮含量為指標(biāo)，對仙鶴草、花生衣中總黃酮進(jìn)行純化，優(yōu)選純化工藝條件；對提純后的兩種總黃酮進(jìn)行組分配伍進(jìn)而進(jìn)行不同配比的藥效學(xué)比較研究，在此基礎(chǔ)上為該復(fù)方后續(xù)物質(zhì)基礎(chǔ)的研究及制劑開發(fā)提供系統(tǒng)、全面的數(shù)據(jù)及理論支撐。
　　方法：按《中國藥典》2010年版一部附錄IX H中水分測定法中的第一法，附錄IX K灰分測定法

2、和酸不溶性灰分測定法和附錄X A浸出物測定法測定。采用單因素篩選結(jié)合響應(yīng)面設(shè)計(jì)法試驗(yàn)，對影響總黃酮含量的提取次數(shù)、乙醇濃度、液料比與提取時(shí)間對龍花方中的仙鶴草與花生衣的提取工藝進(jìn)行考察，確定出最佳的工藝參數(shù)；以總黃酮的吸附率和解吸率為指標(biāo)，考察仙鶴草和花生衣中總黃酮的樹脂的吸附及洗脫條件。腹腔注射環(huán)磷酰胺對小鼠造成血小板減少模型，采用針對小復(fù)方的基線等比設(shè)計(jì)法擬定兩種總黃酮的配比處方。觀察不同處方對模型小鼠外周血小板、紅細(xì)胞、血紅蛋白，

3、臟器指數(shù)的影響。
　　結(jié)果：花生衣中水分不得超過9.6%，灰分不得超過2.5%，酸不溶性灰分不得超過0.27%，水浸出物不得超過11.9%，醇浸出物不得超過25.7%，薄層色譜法可用于鑒別花生衣，高效液相色譜法測定的兒茶素含量穩(wěn)定。仙鶴草的最佳提取工藝為：提取溶劑為50%乙醇，液料比為20倍，提取時(shí)間為70min，提取3次，在提取工藝下，仙鶴草總黃酮平均提取率為9.5%?；ㄉ碌淖罴烟崛」に嚍?提取溶劑為40%乙醇，液料比為15倍

4、，提取時(shí)間為30min，提取3次。在此提取工藝下，花生衣總黃酮的平均提取率為27.21%。D-101型大孔樹脂對仙鶴草和花生衣中總黃酮有較好的分離純化作用。仙鶴草的最佳純化工藝為徑高比為1:10，上樣藥液濃度為0.15g·mL-1，上樣藥液流速為1BV/h，水洗4BV，洗脫溶劑為50%的乙醇，醇洗3BV，純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右。花生衣的最佳純化工藝為徑高比為1:15，上樣藥液濃度為0.1g·mL-1，上樣藥液流速為2B

5、V/h，水洗3BV，洗脫溶劑為70%的乙醇，醇洗3BV，純化后總黃酮純度比純化前提高了30%左右。5個(gè)處方均能提高造模小鼠的血小板數(shù)，處方4作用較為明顯（P＜0.01)，對白細(xì)胞數(shù)，紅細(xì)胞數(shù)、胸腺指數(shù)脾臟指數(shù)及體重變化值也有一定的升高趨勢。
　　結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)初步對花生衣的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了研究，為以后花生衣資源的合理利用奠定了基礎(chǔ)；龍花方中的仙鶴草、花生衣中總黃酮的提取分離純化工藝穩(wěn)定，可行；優(yōu)選出的處方能顯著的提高造膜小鼠的血小板數(shù)