魷魚墨多糖對(duì)環(huán)磷酰胺所致小鼠腸道黏膜上皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用研究.pdf

1、環(huán)磷酰胺是臨床上常用的化療藥物，它在發(fā)揮抗腫瘤作用的同時(shí)常引發(fā)胃腸道不良反應(yīng)，造成胃腸道黏膜損傷。臨床上利用藥物治療胃腸道反應(yīng)具有一定局限性。魷魚墨是豐富易得的海洋生物資源，有著悠久的藥用歷史。魷魚墨的主要成分為黑色素和蛋白多糖復(fù)合體。近年來，魷魚墨多糖被證實(shí)具有多種生理活性，如增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤活性等。本文主要目的是探討魷魚墨多糖對(duì)環(huán)磷酰胺所致腸道黏膜上皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用，為開發(fā)以魷魚墨多糖為功效因子的保健食品、改善化療藥物所致胃腸

2、道黏膜損傷提供理論依據(jù)。
　　論文主要包括三部分內(nèi)容：
　　第一部分：提取魷魚墨多糖及利用環(huán)磷酰胺建立腸黏膜上皮細(xì)胞損傷動(dòng)物模型。魷魚墨經(jīng)過酶解、乙醇沉淀和三氯乙酸除雜蛋白，提取得到魷魚墨粗多糖，得率為1.5％。分析其化學(xué)組分含量得出總糖含量為60.99%、總蛋白含量為9.44%。通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定環(huán)磷酰胺造模劑量為連續(xù)2天腹腔注射(50mg/kg.bw)；通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定魷魚墨多糖灌胃劑量為低劑量組50mg/(kg.bw)、中劑

3、量組100mg/(kg.bw)、高劑量組200mg/(kg.bw)。
　　第二部分：研究魷魚墨多糖對(duì)小鼠腸道黏膜上皮細(xì)胞的保護(hù)作用。觀察小鼠體重變化以及腹瀉現(xiàn)象的發(fā)生，小腸形態(tài)結(jié)構(gòu)的改變及絨毛長度和隱窩深度的改變。研究結(jié)果顯示環(huán)磷酰胺能夠?qū)π∈蟮男∧c黏膜上皮細(xì)胞造成嚴(yán)重?fù)p傷，而魷魚墨多糖的前期攝入可以保護(hù)其免受環(huán)磷酰胺損傷。進(jìn)一步研究顯示，魷魚墨多糖的前期攝入可以提高機(jī)體的抗氧化能力、提高細(xì)胞間緊密連接蛋白的表達(dá)，維持小腸微絨毛形

4、態(tài)，從而保護(hù)小腸黏膜上皮細(xì)胞。
　　第三部分：研究魷魚墨多糖對(duì)小鼠腸道潘氏細(xì)胞和杯狀細(xì)胞的保護(hù)作用，并對(duì)它們的作用機(jī)理進(jìn)行深入的探討。采用低溫WeisserA沉淀法分離和富集得到小腸隱窩和絨毛后，分別研究魷魚墨多糖對(duì)小鼠腸道潘氏細(xì)胞（隱窩）和杯狀細(xì)胞（絨毛）的影響及作用機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：環(huán)磷酰胺能夠降低小鼠腸道潘氏細(xì)胞和杯狀細(xì)胞中抗菌肽的分泌，魷魚墨多糖的前期攝入對(duì)此具有顯著的改善作用。進(jìn)一步研究顯示，魷魚墨多糖促進(jìn)潘氏細(xì)胞中抗

5、菌肽的分泌與改善該細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)有關(guān)；而杯狀細(xì)胞抗菌肽分泌量的提高則與增加了杯狀細(xì)胞的數(shù)量有關(guān)。
　　綜上所述，魷魚墨多糖對(duì)環(huán)磷酰胺所致小鼠腸道黏膜上皮細(xì)胞損傷具有顯著的保護(hù)作用，其作用機(jī)理與增強(qiáng)腸道抗氧化能力、提高上皮細(xì)胞間緊密連接蛋白表達(dá)量、改善潘氏細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激狀態(tài)、增加杯狀細(xì)胞數(shù)量有關(guān)。本論文研究成果為開發(fā)以魷魚墨多糖為功效因子的保健食品提供了理論依據(jù)，不僅將為化療所致腸黏膜損傷患者帶來福音，而且有利于促進(jìn)我國魷魚墨資