九百錘藥液抗風(fēng)濕作用的機(jī)理研究.pdf

1、目的： 類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是當(dāng)前世界范圍內(nèi)嚴(yán)重威脅公眾健康的慢性疾病之一。其致殘率高，直接影響到患者的生活質(zhì)量。屬祖國醫(yī)學(xué)“痹癥”范疇，由于其病程纏綿難愈，又有“頑痹”、“尪痹”之稱。目前在治療上尚無療效理想且毒副作用小的藥物，因此，探索能有效地改善類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎癥狀和預(yù)后，延緩關(guān)節(jié)損害而其不良反應(yīng)可減少的綜合治療方案，具有重要的學(xué)術(shù)和應(yīng)用價(jià)值。 本課題以九百錘藥液為研究對象，以類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的臨床表現(xiàn)為研究切入點(diǎn)，采用佐

2、劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠作為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停^察其對炎癥、疼痛、血流變的影響，進(jìn)而探討九百錘藥液治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的可能作用機(jī)制，為臨床使用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法： (1)動物：WISTAR健康大鼠50只，雄性，體重200±20g,昆明種健康小鼠80只，雌雄各半，體重20±2g。以上動物均為Ⅱ級清潔級，由湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)中心提供。 (2)模型復(fù)制：取凍于卡介苗素1支(50mg)，70℃水浴1h滅活，混入高壓滅菌液體石蠟

3、油和羊毛脂(2：1)的混合物10ml中研勻，制成完全弗氏佐劑(FCA)。取體重200±20g雄性大鼠，以FCA在每鼠右后足趾皮內(nèi)注射0.1ml致炎，復(fù)制佐劑性關(guān)節(jié)炎(AA)大鼠模型。 (3)分組及給藥方案：造模成功的大鼠隨機(jī)分為4組，每組10只；其中A組大鼠不給予任何處理，作正常組進(jìn)行對照。即 A組：正常對照組； B組：空白模型組； c組：正清風(fēng)痛寧對照組；D組：九百錘藥液高劑量組； E組：九百錘藥液低劑量組。以上5組大鼠統(tǒng)一用

4、苦味酸標(biāo)志為1～10號，每鼠給藥容積為10ml/kg·d。正常對照組和空白模型組均以同體積的生理鹽水10ml/kg·d灌胃給藥；正清風(fēng)痛寧組，服藥劑量為30mg/kg·d，將正清風(fēng)痛寧粘成細(xì)末，加生理鹽水配成混懸液，濃度為3mg/ml；將九百錘藥液用蒸餾水以1：1煎煮兩次，兩次藥液混合過濾，濾液濃縮為0.662g生藥/ml，九百錘藥液高、低劑量組的給藥劑量分別為6.62g/kg·d、3.31g/kg·d。均于造模前1d開始用灌胃給藥，1

5、次/d，連續(xù)22d。 實(shí)驗(yàn)1：對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎原發(fā)病變及繼發(fā)病變的影響實(shí)驗(yàn)2：對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠血液流變學(xué)改變的影響實(shí)驗(yàn)3：對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響實(shí)驗(yàn)4：對小鼠痛覺的影響(熱板法)(4)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：所有數(shù)據(jù)均用-x±s表示，組間差異比較采用t檢驗(yàn)。 結(jié)果： (1)對動物模型的分析與評價(jià)：根據(jù)實(shí)驗(yàn)過程中，模型動物在外觀、體重、活動度、關(guān)節(jié)局部肉眼可見的病理變化及全身改變等情況(精神萎靡，體重減輕，食欲下降

6、，皮毛失去光澤，關(guān)節(jié)腫脹、活動不便，耳廓充血，皮下結(jié)節(jié)等)，我們可以得出這樣的結(jié)論：動物造模取得滿意效果。該種動物模型是得到世界公認(rèn)的模型，病理改變?yōu)榛は陆M織炎癥，滑膜增生，血管翳形成，關(guān)節(jié)軟骨和骨組織結(jié)構(gòu)的破壞。具有實(shí)際的實(shí)驗(yàn)價(jià)值。 (2)九百錘藥液對足趾腫脹的抑制方面：九百錘藥液高、低劑量組均能抑制大鼠足趾腫脹，與空白模型組比較具有顯著性差異(p<0.05或p<0.01)，而九百錘藥液高劑量組與正清風(fēng)痛寧組相比，也具有顯著

7、性差異(p<0.05)，說明在對從大鼠原發(fā)病和繼發(fā)病的防治方面，九百錘藥液高劑量組的療效優(yōu)于正清風(fēng)痛寧組，正清風(fēng)痛寧組與九百錘藥液低劑量組療效相當(dāng)(p>0.05)。 (3)血流動力學(xué)改變顯示：與空白模型組相比，九百錘藥液組對大鼠血液流變學(xué)呈現(xiàn)多方面的影響，具體表現(xiàn)為能降低紅細(xì)胞壓積和血漿粘度，同時(shí)降低紅細(xì)胞聚集指數(shù)，從而呈現(xiàn)出全血粘度和全血還原粘度下降。提示九百錘藥液可以改善血液呈現(xiàn)的高凝和高粘狀態(tài)，促進(jìn)和恢復(fù)微循環(huán)的正常狀態(tài)，

8、增加肢體營養(yǎng)，減輕肢體損傷，從而發(fā)揮抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的綜合作用。 (4)九百錘藥液對小鼠二甲苯性炎癥和熱板性疼痛方面的影響：九百錘藥液高、低劑量組對二甲苯誘發(fā)的小鼠急性滲出性炎癥(耳廓腫脹)有明顯的抑制作用，與生理鹽水組比較具有顯著性差異(p<0.05或p<0.01)；鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)采用小鼠熱板法疼痛模型觀察該藥液的鎮(zhèn)痛作用，結(jié)果顯示九百錘藥液能提高小鼠熱刺激所致疼痛的痛閾值，提高痛閾百分率，并且延長痛閾潛伏期，與生理鹽水組比較具有顯著

9、性差異(p<0.05或p<0.01)。并隨著劑量的增加而鎮(zhèn)痛作用增強(qiáng)。 結(jié)論： 實(shí)驗(yàn)研究證明，九百錘藥液具有顯著的抗炎、鎮(zhèn)痛作用，可顯著抑制AA大鼠足趾腫脹及多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，提高AA大鼠的壓力耐痛值，改善從大鼠的免疫器官指數(shù)，同時(shí)明顯減輕病變關(guān)節(jié)滑膜炎癥與增生、防止關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì)的破壞；通過降低全血粘度和全血還原粘度進(jìn)而可以改善血液呈現(xiàn)的高凝和高粘狀態(tài)，促進(jìn)和恢復(fù)微循環(huán)的正常狀態(tài)．該方組方合理，切合RA病機(jī)，療效確切，方便