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文檔簡介
1、目的:以抗腫瘤藥物阿霉素與5-氟尿苷棕櫚酸酯為模型藥物制備長循環(huán)脂質(zhì)體并對其工藝進(jìn)行研究;以HO-8910人卵巢癌細(xì)胞為模型,利用節(jié)拍式低劑量給藥化療方式對模型藥物不同劑型進(jìn)行體外的初步試驗(yàn)。 方法:采用硫酸銨梯度法合并pH梯度法制備阿霉素長循環(huán)脂質(zhì)體;采用逆向蒸發(fā)法制備5-氟尿苷棕櫚酸酯長循環(huán)脂質(zhì)體。將脂質(zhì)體分別在4℃和25℃下密閉放置1個(gè)月,以滲漏率、透光率變化、磷脂含量為指標(biāo)考察其穩(wěn)定性。采用MTT法考察DOX-PEG-L
2、、DOX、5-FURP-PEG-L、5-FURP,以常規(guī)給藥24h和節(jié)拍式低劑量給藥144h對人卵巢癌細(xì)胞H0-8910的細(xì)胞毒性。 結(jié)果:通過正交設(shè)計(jì)篩選出制備阿霉素長循環(huán)脂質(zhì)體的最佳處方為:藥脂比1:10,磷脂-膽固醇比例3:1,外水相pH值為7.6,硫酸銨濃度為155mmol/L,載藥溫度為60℃,平均包封率為92.86%;通過正交設(shè)計(jì)篩選出制備5-氟尿苷棕櫚酸酯長循環(huán)脂質(zhì)體的最佳處方為:藥脂比1:10,磷脂-膽固醇比例3
3、:1,超聲時(shí)間5min,平均包封率為94.35%。ZetasizerNano納米粒度儀/Zeta電位檢測儀檢測脂質(zhì)體,粒徑分布均勻,平均粒徑都在200nm以下。 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,游離阿霉素與阿霉素脂質(zhì)體IC50值24h分別為0.62μg/mL和0.46μg/mL,144h為0.06μg/mL和0.01μg/mL;游離5-氟尿苷棕櫚酸酯與5-氟尿苷棕櫚酸酯脂質(zhì)體IC50值24h分別為1.12μg/mL和0.97μg/mL,1
4、44h分別為0.45μg/mL和0.06μg/mL。 結(jié)論:本文采用UV法測定兩種長循環(huán)脂質(zhì)體中藥物的含量、包封率,采用SephadexG-50葡聚糖凝膠柱分離脂質(zhì)體,方法準(zhǔn)確、簡便、快速。穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,于4℃貯存時(shí),脂質(zhì)體比較穩(wěn)定。兩種藥物長循環(huán)脂質(zhì)體的體外釋藥實(shí)驗(yàn)表明,藥物經(jīng)包封后具有很好的緩釋效果。細(xì)胞研究結(jié)果顯示:兩種抗腫瘤藥物無論是游離藥物或是脂質(zhì)體藥物運(yùn)用節(jié)拍式低劑量給藥的方式在H0-8910細(xì)胞中抑制率明顯優(yōu)
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