2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩75頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:糖毒性是引起2型糖尿病患者胰島細(xì)胞功能衰竭的重要原因,其機制目前尚不明了。在胰島β細(xì)胞內(nèi),內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是胰島素生物合成及新合成胰島素原折疊加工的重要場所。有研究提示短暫暴露于高糖常伴隨IRE1α的磷酸化,活化的IRE1α信號通路對胰島β細(xì)胞有保護作用。而對于糖尿病而言,胰島β細(xì)胞并非短暫而是長期處于高糖環(huán)境下,所以本研究擬通過小鼠胰島細(xì)胞株和大鼠原代胰島體外觀察IRE1α信號通路介導(dǎo)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與持續(xù)暴露于高糖的胰島β細(xì)胞功能之間的關(guān)系

2、。在此基礎(chǔ)上,建立高脂喂養(yǎng)的肥胖動物模型,觀察肥胖大鼠胰島在持續(xù)性高糖條件下是否更容易產(chǎn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,探索內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在其中的作用和可能機制。 材料與方法: 1)將不同濃度葡萄糖(5.6、25和33.3 mmol/L組)分別加入胰島β細(xì)胞株MIN6培養(yǎng)液中,于不同時間點(24 h和96 h)收集細(xì)胞進行相關(guān)檢測。CCK-8法檢測細(xì)胞增殖活力;ELISA法檢測胰島素和胰島素原分泌能力;Real-time PCR和Western

3、 blotting分別檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子Total XBP-1、Spliced XBP-1 mRNA及磷酸化IRE1α蛋白表達。 2)原位灌注法分離胰島,將不同濃度葡萄糖(5.6、25 mmol/L組)分別加入大鼠原代胰島培養(yǎng)液中,培養(yǎng)不同時間(24 h和96 h)后收集胰島進行相關(guān)檢測。 3)建立高脂誘導(dǎo)肥胖大鼠模型,原位灌注分離胰島,置于含25mmol/L葡萄糖的培液中孵育24h和96h,利用Real time

4、PCR和免疫印記技術(shù)檢驗肥胖大鼠胰島內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)分子mRNA及蛋白表達。 結(jié)果: 1)加入葡萄糖后96 h,各組細(xì)胞增殖活力均顯著低于孵育后24 h;在同一時間點,33.3和25 mmol/L組顯著低于5.6 mmol/L組。加入葡萄糖后96 h,33.3 mmol/L組胰島素分泌較干預(yù)后24 h明顯減少,而胰島素原分泌顯著增加。加入葡萄糖后24 h和96 h的各組Spliced XBP-1 mRNA表達,以及加入葡萄糖后

5、96 h的各組Total XBP-1 mRNA和磷酸化XBP- IRE1α蛋白表達,均隨葡萄糖濃度的增加而上調(diào),呈現(xiàn)濃度依賴性。 2) 25mmol/L葡萄糖組經(jīng)96h孵育后,葡萄糖刺激的胰島素分泌能力較24h組明顯下降,胰島素原的分泌較24h有顯著增加。25mmol/L葡萄糖組孵育96小時后,BIP、Sliped-XBP-1 mRNA 表達較24小時顯著減少,CHOP mRNA表達則較24小時明顯增加,且較5.6mmol/L組

6、亦顯著增加。孵育24小時,5.6、25mmol/L葡萄糖組均可磷酸化IRE1α,但96小時后5.6mmolL組的磷酸化IRE1α減弱,25mmol/L組的磷酸化IRE1α則完全消失。 3)孵育96小時后HF組胰島中CHOP mRNA表達較CON組明顯升高,Spliced XBP-1、Total XBP-1無明顯差異。兩組胰島孵育24小時后均可見磷酸化的IRE1α,96小時則明顯減弱。 結(jié)論:持續(xù)性高糖可使胰島β細(xì)胞的增殖

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論