腹瀉型IBS模型大鼠結(jié)腸粘膜MC、5-HT與NGF的表達(dá)及痛瀉要方對(duì)其干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　 探討腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）的發(fā)病機(jī)制和痛瀉要方煎劑干預(yù)腹瀉型IBS模型大鼠結(jié)腸粘膜肥大細(xì)胞（Mast cell、MC）、5羥色胺（5-hydroxytryp-tamine、5-HT）和神經(jīng)生長(zhǎng)因子（Nervous growth factor、NGF）的表達(dá)。
　　 材料與方法：
　　 選用清潔級(jí)新生SD大鼠，年齡8天，體重10g±2g。應(yīng)用慢性結(jié)腸刺

2、激（兩周）與夾尾刺激（一周）相結(jié)合的方法，建立腸道高敏的IBS模型并對(duì)其進(jìn)行評(píng)估。驗(yàn)證造模成功后，將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組為空白對(duì)照組（A組）、模型對(duì)照組（B組）、中藥低劑量組（C組）、中藥中劑量組（D組）、中藥高劑量組（E組）、西藥對(duì)照組（F組）。A組和B組以生理鹽水按1ml/100g灌胃，C、D、E組以痛瀉要方分別按0.25ml/100g、0.5ml/100g、1ml/100g灌胃，F(xiàn)組以斯巴敏按1ml/100g灌胃，連續(xù)28天，每天一次。觀

3、察球囊在各組大鼠腸道內(nèi)擴(kuò)張引起腹部抬起和背部拱起的容量閾值和球囊在各組大鼠腸道內(nèi)不同容量下擴(kuò)張每次持續(xù)5min期間腹壁收縮次數(shù)，用甲苯胺藍(lán)染色法定量測(cè)組織MC含量，免疫組化法觀察5-HT、NGF的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與組織陽(yáng)性表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.用藥后（第12周），痛瀉要方高劑量與斯巴敏都能使腸道致敏后所致的行為學(xué)指標(biāo)恢復(fù)正常，與B組相比E組與F大鼠腹部抬起和背部拱起的擴(kuò)張容量閾值顯著增高（分別為P<0.05，P<0.

4、01）；0.3ml、0.6ml、0.9ml擴(kuò)張容量下，腹壁肌肉收縮次數(shù)顯著降低（分別為P<0.01，P<0.05），且中藥高劑量組與斯巴敏組間無明顯差異。
　　 2.用藥后（第12周），B組與A組相比MC密度顯著升高（P<0.01），形狀不規(guī)則者多見，有的破潰、顆粒溢出胞膜外，甚至形成空泡；E、F組MC密度較B組明顯減少（P<0.05），形狀規(guī)則，呈圓形或橢圓形，與A組相似；E組與F組之間無顯著差異（P>0.05）。說明經(jīng)中藥痛

5、瀉要方高劑量及西藥斯巴敏治療后，模型大鼠結(jié)腸組織粘膜MC數(shù)量減少，明顯抑制了脫顆粒的現(xiàn)象。
　　 3.用藥后（第12周），B組大鼠結(jié)腸免疫染色5-HT與NGF陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)顯著增多（P<0.01），組織陽(yáng)性表達(dá)明顯增強(qiáng)，與A組相比有顯著差異；E、F組較B組大鼠結(jié)腸免疫染色5-HT與NGF陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少（P<0.05），免疫組化染色強(qiáng)度顯著減低，與A組接近；E組與F組之間無明顯差異。說明痛瀉要方高劑量與西藥斯巴敏都能降低模型大鼠結(jié)腸

6、5-HT與NGF陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目和組織的陽(yáng)性表達(dá)。
　　 結(jié)論：
　　 1.中藥痛瀉要方高劑量能提高腸道高敏的大鼠腹部抬起和背部拱起的擴(kuò)張容量閾值，能減少腸道高敏大鼠腹壁肌肉收縮次數(shù)，至恢復(fù)正常。
　　 2.中藥痛瀉要方高劑量能有效抑制模型大鼠MC脫顆粒，減少M(fèi)C數(shù)量，并能降低結(jié)腸免疫染色5-HT與NGF的陽(yáng)性表達(dá)及組織中陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)目，其效果與西藥斯巴敏接近。
　　 3.痛瀉要方作用于IBS的機(jī)制可能是直接