不同干預(yù)措施對C57BL-6J雄性肥胖小鼠TNF-α的影響.pdf

1、目的：建立由高脂飲食誘導(dǎo)的C57BL/6J雄性小鼠肥胖模型，觀察飲食控制、二甲雙胍及羅格列酮干預(yù)治療對肥胖小鼠的體重、血糖、游離脂肪酸、胰島素抵抗水平的變化及腫瘤壞死因子mRNA和蛋白表達的改變，從而為臨床治療提供動物實驗的依據(jù)。 方法：將65只四周齡C57BL/6J 雄性小鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后，隨機分為兩組：一組用普通飼料（脂肪占12％的熱卡），簡稱普食組（n=10）；另一組用高脂飼料（脂肪占60％的熱卡），簡稱高脂組（n=5

2、5）。喂養(yǎng)16周。每周測體重和血糖并記錄，至第16周時，對小鼠體重數(shù)據(jù)進行分析，選擇高脂組中體重大于普食組小鼠體重20％的小鼠共50只，確認其為肥胖小鼠，建立肥胖小鼠模型。將確認為肥胖的小鼠（n=40）隨機分為4組，分別為飲食控制組（恢復(fù)普通飲食）（n=10）、高脂飲食組（繼續(xù)高脂飲食，n=10）和二甲雙胍組（高脂飲食+二甲雙胍，n=10），羅格列酮組（高脂飲食+羅格列酮，n=10）。干預(yù)治療4周后，空腹10小時后測定體重，并用血糖儀測

3、血糖，心臟采血測定血清胰島素（Fins）和血清游離脂肪酸（FFA）。取小鼠附睪及腎周脂肪組織，電子天平稱取濕重，計算內(nèi)臟脂肪重量。用穩(wěn)態(tài)模型評估胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）=FBG×Fins/22.5。用RT-PCR及western-blotting分別檢測小鼠脂肪組織中TNF-α的mRNA及蛋白的表達。 所有數(shù)據(jù)均以x±s表示，采用SPSS11.0對數(shù)據(jù)進行各組數(shù)據(jù)間的方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)

4、果： 1．高脂飲食喂養(yǎng)可誘導(dǎo)C57BL/6J雄性小鼠肥胖，該肥胖小鼠具有一定程度的腹型肥胖及胰島素抵抗的特點。 2．?dāng)z食量的變化：干預(yù)治療后，計算平均每日攝食量，與高脂組相比，飲食控制組有升高趨勢，而羅格列酮組及二甲雙胍組下降趨勢，其中以二甲雙胍組下降最為明顯。 3．體重的變化：四組小鼠平均體重與16周時相比，均有下降趨勢。與高脂組小鼠平均體重相比，飲食控制組下降最明顯，而羅格列酮組小鼠平均體重高于高脂組。

5、 4．內(nèi)臟脂肪重量的變化：干預(yù)治療后，與高脂組相比，飲食控制組、二甲雙胍組、羅格列酮組內(nèi)臟脂肪重量均有下降趨勢。以飲食控制組最為明顯。 5．血糖的變化: 干預(yù)治療后，與高脂組相比，飲食控制組、二甲雙胍組、羅格列酮組空腹血糖均有下降。以二甲雙胍組最為明顯，但三組間下降幅度無明顯差異。 6．血清游離脂肪酸的變化：干預(yù)治療后，與高脂組相比，飲食控制組、二甲雙胍組和羅格列酮組小鼠血清游離脂肪酸均有下降趨勢。其中以飲食控制組最為

6、明顯，其次為羅格列酮組。 7．空腹血清胰島素的變化: 干預(yù)治療后，與高脂組相比，飲食控制組、二甲雙胍組、羅格列酮組空腹血清胰島素水平均有下降趨勢，以飲食控制組最為明顯。 8． HOMA-IR的變化：干預(yù)治療后，與高脂組相比，飲食控制組、二甲雙胍組及羅格列酮組均有降低趨勢，僅飲食控制組和羅格列酮組有統(tǒng)計學(xué)意義。 9.脂肪組織TNF-α mRNA及蛋白表達變化: 16周時，高脂組小鼠脂肪組織TNF-α mRNA及蛋白

7、表達與普食組相比分別為：0.63±0.26 vs0.13±0.06，0.60±0.04vs0.38±0.01。TNF-α mRNA及蛋白表達均明顯增高。干預(yù)治療后，飲食控制組、二甲雙胍組及羅格列酮組脂肪組織內(nèi)TNF-α mRNA及蛋白的表達均有下降趨勢。其中以飲食控制組最為明顯，TNF-α mRNA及蛋白的表達分別為0.025±0.06及0.26±0.007；其次羅格列酮組，TNF-α mRNA及蛋白的表達分別為0.12±0.01 及0

8、.46±0.024；而二甲雙胍組，其TNF-α mRNA及蛋白的表達分別為0.22±0.021 及0.54±0.008。 結(jié)論： 1．本實驗通過高脂飲食飼養(yǎng)C57BL/6J雄性小鼠并成功建立肥胖小鼠模型，此模型還具有一定程度的腹型肥胖及胰島素抵抗的特點。 2.飲食干預(yù)治療可以明顯降低C57BL/6J雄性肥胖小鼠的體重、內(nèi)臟脂肪重量、血糖、血FFA、血清胰島素水平，改善HOMA-IR,減少脂肪組織TNF-α mRN