基底核出血后的錐體束損害及血腫抽吸對(duì)其影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分大鼠基底核腦出血后錐體束改變的顯微和超微結(jié)構(gòu)觀察
　　 目的：研究大鼠基底核腦出血后錐體束的病理變化規(guī)律及特點(diǎn)。
　　 方法：體重250-300g的清潔級(jí)雄性SD大鼠72只用作光鏡檢查，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=8只)、假手術(shù)組(n=32只)，腦出血組(n=32只)，其中假手術(shù)組和腦出血組再各分為4個(gè)亞組：1d組、3d組、7d組和14d組，每個(gè)亞組8只。體重250-300g的清潔級(jí)雄性SD大鼠10只用作電鏡檢查，隨

2、機(jī)分為正常對(duì)照組、腦出血1d組、3d組、7d組和14d組，每組2只。腦出血組將Ⅳ型膠原酶-肝素混合液立體定向注入大鼠基底核誘導(dǎo)形成腦出血；假手術(shù)組使用生理鹽水代替Ⅳ型膠原酶-肝素混合液，手術(shù)過(guò)程同腦出血組；正常對(duì)照組不予人為干預(yù)，第7天處死。用作光鏡檢查的各組大鼠到達(dá)時(shí)間點(diǎn)處死后分別采用勞克堅(jiān)牢藍(lán)(1uxolfast blue，LFB)染色、神經(jīng)絲蛋白(neurofilament，NF)免疫組化染色對(duì)內(nèi)囊后肢進(jìn)行觀察，電鏡組大鼠處死后制

3、作電鏡標(biāo)本在透射電鏡下對(duì)內(nèi)囊后肢進(jìn)行觀察。
　　 結(jié)果：假手術(shù)組大鼠未見(jiàn)明顯的神經(jīng)功能缺損體征，Ⅳ型膠原酶-肝素聯(lián)合誘導(dǎo)的腦出血大鼠均具有明顯的神經(jīng)功能缺損。光鏡發(fā)現(xiàn)正常對(duì)照組和假手術(shù)組錐體束髓鞘染成藍(lán)色，著色清晰，腦出血組髓鞘有不同程度的丟失，1d到3d逐漸加重，7d開(kāi)始再生修復(fù)。正常對(duì)照組和假手術(shù)組錐體束軸突數(shù)量多，排列密集，腦出血組軸突數(shù)量和排列都發(fā)生變化，1d到7d軸突損傷持續(xù)加重，14d軸突光度值(0.09±0.01)

4、有所增加，但與7d(0.10±0.02)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。電鏡顯示正常對(duì)照組錐體束髓鞘呈圓形，板層清晰，軸突位于髓鞘中心，形狀規(guī)則，腦出血1d錐體束髓鞘松解，軸突水腫，部分無(wú)髓軸突崩解壞死消失，3d髓鞘松解、空泡樣變性，局部髓鞘消失、厚薄不均，軸突水腫嚴(yán)重，甚至壞死崩解。
　　 結(jié)論：Ⅳ型膠原酶-肝素能成功建立具有典型神經(jīng)功能缺損的大鼠腦出血模型。大鼠腦出血后1w內(nèi)錐體束損傷呈進(jìn)行性加重，提示應(yīng)早期和超早期予以干預(yù)治

5、療以減輕損傷和促進(jìn)修復(fù)。
　　 第二部分微創(chuàng)血腫抽吸治療對(duì)基底核腦出血大鼠錐體束的干預(yù)影響
　　 目的：探討微創(chuàng)血腫抽吸治療對(duì)錐體束修復(fù)和神經(jīng)功能改善的作用，為臨床外科治療中等量腦出血提供基礎(chǔ)研究的理論依據(jù)。
　　 方法：體重250-300g的清潔級(jí)雄性SD大鼠64只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(n=8只)、假手術(shù)組(n=24只)，腦出血自然恢復(fù)組(n=8只)，腦出血微創(chuàng)血腫抽吸組(n=24只)，其中假手術(shù)組和腦出血微創(chuàng)

6、血腫抽吸組再各分為3個(gè)亞組：6h組、12h組和24h組，每個(gè)亞組8只。使用Ⅳ型膠原酶-肝素誘導(dǎo)大鼠基底核腦出血，微創(chuàng)血腫抽吸組分別在注入膠原酶后4h、10h或22h向原注射點(diǎn)注入尿激酶3000U，2h后沿原針道緩慢抽吸，假手術(shù)組用生理鹽水代替尿激酶，方法同抽吸組。2周后采用“樓梯測(cè)試”前肢功能測(cè)試方法對(duì)各組大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分，經(jīng)心臟灌注取腦組織，對(duì)內(nèi)囊后肢前部行神經(jīng)絲蛋白(neurofilament，NF)和神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(grow

7、th associated protein-43，GAP-43)免疫組化染色，利用圖像分析軟件對(duì)免疫組化結(jié)果進(jìn)行光密度分析。
　　 結(jié)果：腦出血微創(chuàng)血腫抽吸組前肢抓取功能均高于自然恢復(fù)組(P＜0.05)，其中腦出血后6h抽吸組高于12h抽吸組和24h抽吸組(P＜0.05)，12h抽吸組和24h抽吸組之間無(wú)顯著差異(P＞0.05)。NF免疫組化染色結(jié)果顯示微創(chuàng)血腫抽吸組NF染色陽(yáng)性纖維明顯多于自然恢復(fù)組(P＜0.05)，6h抽吸組

8、的NF染色陽(yáng)性纖維相對(duì)于12h和24h抽吸組表達(dá)更多(P＜0.05)。GAP-43染色發(fā)現(xiàn)各抽吸組GAP-43的表達(dá)高于自然恢復(fù)組(P＜0.05)，抽吸組之間比較，24h抽吸組GAP-43的表達(dá)最弱，與其它兩抽吸組比較具有顯著性(P＜0.05)，6h抽吸組和12h抽吸組間無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：“樓梯測(cè)試”前肢功能測(cè)試評(píng)分能較好反映錐體束的損傷情況。腦出血后24h內(nèi)，尤其是6h內(nèi)即予以微創(chuàng)血腫抽吸治療能減輕錐體