大鼠胸10節(jié)段脊髓損傷致膀胱順應性改變及形態(tài)學研究.pdf

1、目的:
　　通過建立大鼠胸10節(jié)段脊髓橫斷模型，誘導出神經源性膀胱，觀察胸10節(jié)段脊髓橫斷致大鼠膀胱順應性改變后膀胱重量、逼尿肌漏尿點壓、膀胱順應性、膀胱壁組織結構及ICC細胞分布、數量的變化。探討不同順應性膀胱的病理生理改變，明確ICC細胞在神經源性低順應性膀胱發(fā)病中的作用，為進一步豐富和完善神經源性低順應性膀胱發(fā)病機理及治療提供必要的理論和實驗基礎，同時，為后續(xù)進一步實驗提供前期支持。
　　方法:
　　正常成年雌性

2、Wistar大鼠40只，體重在210-220g，隨機分為兩組:A組8只、B組32只。A組為假手術對照組，B組為胸10節(jié)段脊髓橫斷組。主要步驟為:稱重、麻醉后，鼠板俯臥位固定，定位:根據浮肋連接的第13胸椎作為骨性標志定位至胸10節(jié)段脊髓（對應脊柱第8胸椎），確定損傷部位后背部備皮、消毒，取背部正中切口，依次切開皮膚、皮下筋膜、向兩側鈍性分離豎脊肌，破壞椎體，直至暴露脊髓，用眼科手術刀將脊髓快速切斷（可見大鼠后肢痙攣性抽搐數次后軟癱，用顯

3、微剪剪除一段約1mm長脊髓，保證脊髓完全橫斷）。對照組只暴露脊髓，不切斷，逐層縫合切口。各組均于手術后6周行尿動力學檢測，檢測完成后處死大鼠并留取膀胱標本，行膀胱稱重。常規(guī)HE染色觀察膀胱壁平滑肌、纖維結締組織變化;VG染色及Vaehoeff染色，光鏡下觀察膀胱中肌層厚度、膠原纖維及彈力纖維量的變化;應用免疫熒光技術觀察ICC細胞在膀胱壁的分布及數量，每個標本隨機選取5個視野，得到的數碼照片用Image pro圖像處理軟件分析，計算每個

4、視野ICC細胞數量，進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　1.成功制作了大鼠胸10節(jié)段脊髓橫斷動物模型并順利地進行了大鼠膀胱尿流動力學測定。
　　2.膀胱順應性:至行尿流動力學檢測時，32只實驗組大鼠，死亡10只，尿流動力學結果顯示，存活的22只大鼠中，神經源性高順應性膀胱大鼠12只，神經源性低順應性膀胱大鼠6只，正常順應性膀胱大鼠4只。神經源性高順應組膀胱順應性與假手術對照組相比明顯升高，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);神經

5、源性低順應組膀胱順應性與假手術對照組相比明顯降低，有顯著差異(P＜0.01)。
　　3.形態(tài)學研究顯示:
　　胸10節(jié)段脊髓橫斷6周后膀胱結構和功能發(fā)生了明顯改變，膀胱重量明顯增加，實驗組膀胱重量明顯比對照組重，有顯著差異(P＜0.01);膀胱/體重比實驗組明顯高于對照組，有顯著差異(P＜0.01)。
　　光鏡觀察到胸10節(jié)段脊髓橫斷6周后逼尿肌出現(xiàn)不同程度的肌萎縮，肌束間膠原纖維浸潤顯著增多;低順應組纖維結締組織的百

6、分含量明顯大于對照組及高順應組，有顯著差異(P＜0.01);高順應組纖維結締組織百分含量大于對照組，有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。熒光顯微鏡觀察顯示不同組間ICC細胞有所變化，高順應組平均每視野下ICC數量較正常組明顯減少(P＜0.01)，差異顯著;低順應組平均每個視野下ICC數量較正常組明顯增加(P＜0.01)，差異顯著。
　　結論:
　　1胸10節(jié)段脊髓損傷對膀胱功能的影響在膀胱順應性上可表現(xiàn)為高順應性及低順應性兩類，具

7、體類型應根據尿流動力學結果劃分。
　　2神經源性膀胱尿流動力學表現(xiàn)為:低順應組膀胱最大容量降低、逼尿肌漏尿點壓力增高、膀胱順應性降低;高順應組膀胱最大容量增大、逼尿肌漏尿點壓力降低、膀胱順應性升高。
　　3胸10節(jié)段脊髓損傷后，膀胱壁組織發(fā)生重塑，逼尿肌出現(xiàn)不同程度的肌萎縮，肌束間膠原纖維浸潤，纖維結締組織含量發(fā)生變化，影響膀胱順應性。
　　4胸10節(jié)段脊髓損傷后，不同順應性組別間ICC數量發(fā)生變化，可能與膀胱順應性發(fā)