突觸素和苔蘚纖維在液壓損傷大鼠外傷后癲癇發(fā)生中的作用.pdf

1、目的： 1、通過對液壓損傷后大鼠行為學(xué)和腦電圖的研究,以分析其在外傷后癲癇中的研究價值。 2、通過對液壓損傷后突觸素和苔蘚纖維在外傷后癲癇和非癲癇大鼠大腦內(nèi)變化的研究,以探討外傷后癲癇的發(fā)病機制。 方法： 1、液壓損傷大鼠外傷后癲癇動物模型的建立：參照D'Ambrosio提出的液壓損傷建立大鼠外傷后癲癇動物模型。 2、實驗分組：58只大鼠隨機分為：①對照組(A組)8只(予以實驗組大鼠相同的手術(shù)操作

2、,但不給打擊),②實驗組(B組)50只,用液壓裝置制成顱腦損傷動物模型,存活的大鼠進行3個月行為學(xué)和腦電圖觀察、記錄,有癲癇發(fā)作的歸為癲癇組(C組),余為非癲癇組(D組),③自身對照組：取大鼠相對應(yīng)的右側(cè)大腦為自身對照標(biāo)本,分3組:E組(A組右側(cè)),F組(C組右側(cè)),G組(D組右側(cè))。觀察記錄結(jié)束后處死大鼠,取損傷區(qū)及相應(yīng)對側(cè)皮質(zhì)內(nèi)的腦組織行突觸素免疫組化學(xué)和海馬內(nèi)苔蘚纖維Timm染色。 3、樣品采集與檢測：大鼠腹腔麻醉后,經(jīng)左

3、心室-升主動脈插管,室溫下灌注生理鹽水(4℃)150ml,隨后依次灌注4％多聚甲醛的PBS(0.01mol/L,pH7.4,4℃)液200ml,0.4％硫化鈉的PBS(0.01mol/L,pH7.4,4℃)液200ml。2小時后取出大腦,用4％多聚甲醛固定液固定24h(PH 7.0,4℃),沿視交叉后緣作冠切,后部分放入30％蔗糖過夜沉底,冰凍切片,Timm染色；前部分用4％多聚甲醛固定液固定,一周后常規(guī)腦組織脫水、透明、石蠟包埋,冠狀

4、切片,突觸素免疫組化染色。 結(jié)果： 在液壓損傷(死亡率38.0％)后存活的31只大鼠中有11只出現(xiàn)癲癇,發(fā)生率35.5％。癲癇的發(fā)作形式表現(xiàn)為面肌痙攣、點頭樣運動、四肢抽搐、翻轉(zhuǎn)跳起等。液壓損傷后1～2月內(nèi)為癲癇發(fā)生的高峰期。癲癇發(fā)作時同期腦電圖可見癲癇樣放電。液壓損傷后部分非癲癇大鼠腦電圖表現(xiàn)為1-5導(dǎo)聯(lián)波幅增高、頻率增快。突觸素在皮質(zhì)損傷區(qū)表達癲癇組高于非癲癇組(P<0.05),苔蘚纖維出芽在癲癇組損傷側(cè)CA3區(qū)始層