NF-kB在腰5脊神經(jīng)結(jié)扎引起的神經(jīng)病理性疼痛中的作用.pdf

1、研究背景：神經(jīng)病理性疼痛是由于中樞或外周神經(jīng)損傷及炎癥所引起的慢性疼痛,表現(xiàn)為痛覺過敏、痛覺超敏及自發(fā)性疼痛。雖然國內(nèi)外已經(jīng)進行了大量研究,但其機制仍然很不清楚。近年來的研究發(fā)現(xiàn)神經(jīng)損傷后損傷纖維的Wallerian變性及局部炎癥刺激產(chǎn)生的致炎細胞因子,如白介素-1(IL-1)、腫瘤壞死因子(TNF)等在病理性疼痛的產(chǎn)生和維持階段發(fā)揮重要作用,而IL-1和TNF的合成,以及其作用的發(fā)揮都與核因子-kappa B(NF-kB)的激活密切相

2、關(guān),但目前有關(guān)NF-kB在神經(jīng)病理性疼痛中的作用的研究還很不完善。
　　目的：采用腰5脊神經(jīng)結(jié)扎(L5 SNL)引起的神經(jīng)病理性疼痛模型,通過鞘內(nèi)或腹腔注射NF-kB激活抑制劑PDTC,研究NF-kB在大鼠神經(jīng)病理性疼痛中的作用;并進一步采用免疫熒光組織化學和免疫熒光雙標技術(shù)觀察NF-kB在L5和L4背根神經(jīng)節(jié)(DRG)的激活及激活的細胞類型。
　　方法：實驗動物采用成年雄性SD大鼠。首先在L5 SNL手術(shù)前后不同時間點,鞘

3、內(nèi)或腹腔注射不同劑量的NF-kB激活抑制劑PDTC,通過行為學測試觀察NF-kB在神經(jīng)病理性疼痛的作用。然后通過免疫熒光組織化學方法觀察L5 SNL術(shù)后不同時間點NF-kB在L5及L4 DRG的激活程度,并進一步采用免疫熒光雙標技術(shù)觀察NF-kB激活的細胞類型。本實驗中行為學測試采用up-down方法來測試大鼠的50％機械刺激撤足閾值,用熱輻射測試儀測試熱刺激撤足潛伏期。免疫組織化學結(jié)果通過計算NF-kB-免疫活性(IR)陽性細胞的百分

4、比來定量分析。
　　結(jié)果：1.行為學測試結(jié)果顯示:L5 SNL可引起大鼠手術(shù)同側(cè)后肢機械刺激痛覺超敏和熱刺激痛覺過敏;L5 SNL術(shù)前0.5h鞘內(nèi)或腹腔注射PDTC(1ug/10ul,100mg/kg),而后每天1次,持續(xù)7d,能完全阻斷L5 SNL引起的痛覺超敏及痛覺過敏;L5 SNL術(shù)后1d開始鞘內(nèi)注射PDTC(1ug/10ul),每天1次,持續(xù)7d,也可阻斷L5 SNL誘導的痛覺超敏及痛覺過敏;L5 SNL術(shù)后7d開始鞘內(nèi)注

5、射PDTC(1ug/10ul),每天1次,至術(shù)后14d,對已經(jīng)建立起來的痛覺超敏及痛覺過敏均無顯著影響。2.免疫熒光組化結(jié)果顯示:與假手術(shù)組相比,L5 SNL術(shù)后1d手術(shù)同側(cè)L5及L4 DRG中NF-kB-IR陽性細胞百分比增加,3d達到高峰,并保持到術(shù)后14d左右;術(shù)前0.5h開始鞘內(nèi)注射PDTC(1ug/10ul),而后每天1次,持續(xù)3d,可以抑制L5 DRG細胞中NF-kB的激活。3.免疫熒光雙標結(jié)果顯示NF-kB激活于衛(wèi)星樣膠質(zhì)