PNIPAAm-PEO納米粒在兔眼部的毒理學(xué)效應(yīng)和鹽酸去甲萬古霉素-PNIPAAm-PEO納米粒在兔眼內(nèi)的藥物動力學(xué).pdf

1、背景和目的：玻璃體腔注射給藥是治療眼后節(jié)疾病的常規(guī)方法，它可以繞過血-眼屏障，維持眼內(nèi)有效的治療濃度，同時也避免了全身性的藥物毒副作用。但是由于傳統(tǒng)給藥方式維持藥物有效治療濃度的時間短暫，多次頻繁注射也會增加眼內(nèi)注射的并發(fā)癥風(fēng)險，所以研制眼內(nèi)緩釋給藥系統(tǒng)已成為眼后段疾病藥物治療的一個重要發(fā)展方向，而多種眼內(nèi)植入的生物高分子載體材料就成為其中的研究熱點(diǎn)。聚N-異丙基丙烯酰胺-聚氧化乙烯(PNIPAAm-PEO)是一種新合成的多聚物材料，結(jié)

2、構(gòu)中起主要作用的是PNIPAAm，它的溫度敏感特性一直作為一種智能化的對象備受關(guān)注。本研究的目的在于：
　　(1)了解PNIPAAm-PEO納米粒在兔眼內(nèi)的毒理學(xué)效應(yīng)，評估其用于玻璃體腔內(nèi)注射的可行性；
　　(2)通過高效液相色譜分析測定在兔眼玻璃體腔注射載鹽酸去甲萬古霉素的PNIPAAm-PEO(NV-PNIPAAm-PEO)納米粒后的眼內(nèi)各組織和血漿的藥物動力學(xué)特征，進(jìn)一步探討載藥納米粒應(yīng)用于眼內(nèi)藥物控釋的可行性。

3、>　　方法：
　　(1)PNIPAAm-PEO納米粒經(jīng)γ射線消毒后經(jīng)無菌生理鹽水稀釋成不同濃度(1mg/0.1mL、2mg/0.1mL、3mg/0.1mL、4mg/0.1mL)的凝膠液。選取健康新西蘭兔分別接受局部點(diǎn)眼和玻璃體腔注射不同濃度的凝膠稀釋液，分別于給藥后的第1、2、3、7和14天行裂隙燈、檢眼鏡、視網(wǎng)膜電圖和B超檢查，觀察局部組織反應(yīng)及組織病理學(xué)變化。對照組點(diǎn)用0.1mL無菌生理鹽水。
　　(2)22％載藥量的鹽

4、酸去甲萬古霉素-PNIPAAm-PEO納米粒經(jīng)γ射線消毒后經(jīng)無菌生理鹽水稀釋配制成2mg/0.1mL(含藥量0.44mg/0.1mL)的凝膠液。健康新西蘭兔眼玻璃體內(nèi)注射0.1mL后，于第l、2、3、7、14、2l和28天分別進(jìn)行裂隙燈、檢眼鏡和B超檢查，同時于各時間點(diǎn)分別取角膜、房水、玻璃體、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜和血漿樣品各三份，進(jìn)行高效液相色譜分析。
　　結(jié)果：
　　(1)兔眼角結(jié)膜對檢測濃度范圍內(nèi)的PNIPAAm-PEO有良好

5、耐受性，眼部無刺激癥狀。玻璃體腔內(nèi)注射1mg和2mg組未見明顯視網(wǎng)膜毒性反應(yīng)。3mg組眼底檢查無異常，ERG-b波第1～3天下降幅度〉30％，第7～14天略有恢復(fù)；第14天光鏡下視網(wǎng)膜部分感光細(xì)胞外節(jié)間隙增寬，外叢狀層以內(nèi)結(jié)構(gòu)空泡變性，細(xì)胞排列正常；電鏡下各層均有較明顯的結(jié)構(gòu)改變，廣泛的細(xì)胞水腫和空泡變性，感光細(xì)胞膜盤結(jié)構(gòu)基本正常。4mg組各時間點(diǎn)ERG-b波波幅下降率均〉30％；第1～14天組織病理學(xué)觀察均有明顯視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)破壞，部分感

6、光細(xì)胞外節(jié)結(jié)構(gòu)消失，部分區(qū)域內(nèi)核層排列不規(guī)則，內(nèi)外叢狀層、內(nèi)核層和神經(jīng)纖維層有廣泛空泡變性；電鏡下各層細(xì)胞間隙增大，廣泛空泡變性，感光細(xì)胞部分盤膜崩解，層狀結(jié)構(gòu)紊亂、模糊不清。
　　(2)實(shí)驗期限內(nèi)，臨床觀察前節(jié)及眼底均未見異常。角膜藥物濃度始終均低于檢測水平下限(50ng/mL)；房水和視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜藥物濃度分別為0.08～2.16μg/mL和0.11～2.54μg/g；玻璃體藥物濃度為5.65～436.69μg/mL；血漿藥物濃

7、度最高為0.26μg/mL，遠(yuǎn)低于玻璃體內(nèi)濃度。血漿、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜組織和房水中鹽酸去甲萬古霉素-PNIPAAm-PEO納米粒的釋藥特征大致呈兩相：初始突釋和漸弱釋藥，其中藥物濃度分別在第14天、28天和28天低于檢測限，玻璃體內(nèi)維持有效治療藥物濃度(>10μg/mL)可達(dá)21天，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出大多數(shù)G+菌的最低抑菌濃度。各方面臨床觀察提示鹽酸去甲萬古霉素-PNIPAAm-PEO納米粒在眼內(nèi)有較好的生物相容性和安全性。
　　結(jié)論：