沉默Glypican-3基因增強人肝癌細胞HepG2對化療藥物至凋亡作用的敏感性.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、Glypican-3(GPC3)為膜性硫酸乙酰肝素多糖蛋白,通過糖基磷脂酰肌醇(GPI)結(jié)合于細胞表面,是硫酸類肝素糖蛋白聚糖(glypican)家族成員?,F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)在肝癌細胞中高度表達并參與其發(fā)生發(fā)展。
   目的:
   沉默人肝癌細胞HepG2的GPC3基因表達,觀察其對5-氟尿嘧啶(5-FU)和順鉑(CDDP)的藥物敏感性及細胞凋亡情況的影響。
   方法:
   1.構(gòu)建干擾GPC3的shRNA載

2、體,將其轉(zhuǎn)染至肝癌細胞,并設(shè)立對照組。
   2.Western blot測定GPC3蛋白表達情況。
   3.利用MTT法測定轉(zhuǎn)染后肝癌細胞對5-FU及順鉑的藥物敏感性。
   4.采用流式細胞技術(shù)觀察轉(zhuǎn)染后肝癌細胞在5-FU及順鉑作用下的細胞凋亡情況。
   結(jié)果:
   轉(zhuǎn)染shRNA的肝癌細胞其GPC3表達陰性;其對5-FU及順鉑的藥物敏感性增加(P<0.05);細胞凋亡較對照組增加(P<

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