人巨細(xì)胞病毒編碼蛋白pUL23選擇性調(diào)控干擾素γ刺激基因的表達(dá).pdf

1、目的：人巨細(xì)胞病毒（Human cytomegalovirus，HCMV）是一種典型的β皰疹病毒，在人群中廣泛感染，HCMV UL23基因?qū)儆赨S22基因家族成員，它的編碼產(chǎn)物pUL23大小約為33 kDa，為病毒皮層組分之一。實(shí)驗(yàn)室前期結(jié)果已經(jīng)表明，pUL23能夠抑制γ干擾素依賴的JAK/STAT1信號(hào)途徑，抵抗干擾素抗病毒作用，γ干擾素途徑調(diào)控著上千個(gè)基因，包括多種抗病毒基因的表達(dá)。本課題旨在探討pUL23對(duì)干擾素刺激基因表達(dá)的影響

2、，為闡明pUL23能夠抵抗γ干擾素抗病毒的分子機(jī)理奠定基礎(chǔ)。
　　方法：1）生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)受人巨細(xì)胞病毒調(diào)控的γ干擾素刺激基因，作為后續(xù)研究的候選基因。2）人巨細(xì)胞病毒Towne株和缺失UL23基因的Towne-delUL23病毒株分別感染HFF細(xì)胞，γ干擾素處理前后，采用q-PCR技術(shù)檢測(cè)干擾素刺激基因的mRNA表達(dá)水平，分析病毒感染過(guò)程中pUL23對(duì)干擾素刺激基因表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：1）NextBio平臺(tái)篩選出9

3、個(gè)受γ干擾素調(diào)控，基因表達(dá)增加改變倍數(shù)較大，并與巨細(xì)胞病毒感染相關(guān)的γ干擾素刺激基因，IFI44L、IFP35、NMI、IFIT3、STAT1、IRF1、IRF7、OAS1、SP110和1個(gè)對(duì)γ干擾素信號(hào)途徑具有負(fù)調(diào)控作用的基因UBE2I，作為后續(xù)研究病毒蛋白pUL23調(diào)控的候選基因。2）Towne病毒感染組與Towne-delUL23病毒感染組相比，q-PCR實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明①對(duì)于IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因，γ干擾素

4、未處理時(shí)，pUL23對(duì)IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因的表達(dá)無(wú)顯著性影響，γ干擾素處理后，pUL23抑制IFI44L、IFP35、NMI、STAT1基因mRNA表達(dá)；②對(duì)于OAS1、SP110基因，γ干擾素未處理時(shí)，pUL23促進(jìn)OAS1、SP110基因mRNA表達(dá)，干擾素處理后，pUL23抑制SP110 mRNA表達(dá)，但是，pUL23或促進(jìn)或抑制OAS1基因的表達(dá)；③對(duì)于IRF1基因，γ干擾素處理前后，pUL23均能抑