繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)患者甲狀旁腺組織體外培養(yǎng)的初步探討.pdf

1、背景和目的：
　　 繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)(secondaryhyperparathyoidism，SHPT)是慢性腎臟疾病礦物質(zhì)和骨代謝異常(CKD，mineralandbonedisorders，CKD-MBD)引起的多系統(tǒng)病變所致的臨床綜合癥。大量臨床研究已經(jīng)證實(shí)：SHPT的代謝紊亂不僅會(huì)引起全身性骨病，增加終末期腎病(EsRD)病人的發(fā)病率和病死率，還會(huì)導(dǎo)致軟組織及血管鈣化、冠心病、尿毒癥、小動(dòng)脈鈣化病，增加病人心血管疾

2、病的發(fā)病率及病死率。
　　 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)SHPT的治療研究頗多，但對(duì)于藥物治療無(wú)效的難治性SHPT手術(shù)治療仍存在諸多問(wèn)題，如：甲狀旁腺全切除術(shù)(TPTX)則有并發(fā)術(shù)后持續(xù)性甲狀旁腺功能低下(hypoparathyroidism，HPT)的風(fēng)險(xiǎn)，甲狀旁腺全切除+自體移植(Parathyroidectomywithautotransplatation，TPTX+AT)會(huì)增加SHPT復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)．。延遲自體移植則是在確診持續(xù)性甲狀旁

3、腺功能低下癥后進(jìn)行的，這樣既能最大程度上避免SHPT的復(fù)發(fā)，又能給患者治療持續(xù)性甲狀旁腺功能低下提供了另外一條治療途徑。
　　 本課題通過(guò)檢測(cè)甲狀旁腺組織經(jīng)冰凍保存再?gòu)?fù)蘇后有無(wú)分泌功能，為甲狀旁腺全切除術(shù)后出現(xiàn)持續(xù)性低鈣血癥的患者行再次自體移植提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 病例選擇：選取因難治性繼發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)在中日友好醫(yī)院行甲狀旁腺全切除術(shù)的慢性腎臟病透析患者7例。
　　 組織培養(yǎng)：每例選擇

4、肉眼觀察甲狀旁腺增生程度相對(duì)較輕的組織約300mg，快速剪碎后分3組，對(duì)照組為新鮮組織（1組），置入含85％RPMI1640培養(yǎng)基+15％FBS(胎牛血清)的培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)組為凍存組織（2組）置入含60％RPMI1640培養(yǎng)基+30％自體血清+10％DMSO（二甲基亞砜）混合凍存液中，將實(shí)驗(yàn)組利用可控程序冷凍盒于-80℃冰箱逐漸降溫，次日移入液氮罐保存并登記患者資料，在術(shù)后1月、3月分別對(duì)冷凍甲狀旁腺組織進(jìn)行復(fù)蘇，并按與對(duì)照組相

5、同的培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng)。將培養(yǎng)皿置于37℃含5％CO2的培養(yǎng)箱中恒溫培養(yǎng)，并分別于培養(yǎng)1d、5d、10d、15d時(shí)提取培養(yǎng)上清液，檢測(cè)不同時(shí)間段iPTH。
　　 組織超微結(jié)構(gòu)觀察：取新鮮組織及凍存1月、3月后復(fù)蘇的標(biāo)本，戊二醛固定，常規(guī)切片，行透射電鏡觀察。
　　 結(jié)果：
　　 本實(shí)驗(yàn)切取的甲狀旁腺組織經(jīng)形態(tài)學(xué)及全段甲狀旁腺激素(iPTH)檢測(cè)證實(shí)。凍存后再?gòu)?fù)蘇的甲狀旁腺組織仍有分泌功能，較新鮮甲狀旁腺組織分泌功能